[发明专利]一种快速鉴别东方无线鳎和黑颊无线鳎的分子生物学方法在审
| 申请号： | 201811212260.X | 申请日： | 2018-10-09 |
| 公开（公告）号： | CN109097483A | 公开（公告）日： | 2018-12-28 |
| 发明（设计）人： | 龚理;孔晓瑜 | 申请（专利权）人： | 浙江海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 | 代理人： | 尉伟敏 |
| 地址： | 316100 浙江省舟山市普陀区普*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及分子生物技术领域，解决了通过测序的方法对物种鉴定存在操作繁琐、耗费时间较长的问题，公开了一种快速鉴别东方无线鳎和黑颊无线鳎的分子生物学方法。该方法先分别提取东方无线鳎和黑颊无线鳎的基因组DNA，然后设计扩增ITS区域的通用引物，使用通用引物分别对东方无线鳎和黑颊无线鳎的基因组DNA进行核糖体内转录ITS区扩增反应，得到两者扩增产物，最后分别对两者扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳分析，比较扩增产物长度，条带长的为黑颊无线鳎，条带短的为东方无线鳎。本发明直接通过比较序列长度进行物种鉴别，从而免去了测序过程，既节约了成本，大大提高了工作效率。 | ||
| 搜索关键词： | 扩增产物 分子生物学 基因组DNA 快速鉴别 通用引物 条带 琼脂糖凝胶电泳 分子生物技术 转录 测序过程 工作效率 扩增反应 物种鉴别 物种鉴定 测序 核糖 扩增 体内 节约 分析 | ||
【主权项】：
1.一种快速鉴别东方无线鳎和黑颊无线鳎的分子生物学方法，其特征在于，包括以下步骤：1)分别提取东方无线鳎和黑颊无线鳎的基因组DNA；2)从Genbank数据库中获取鲽形目舌鳎科鱼类18SrDNA和28SrDNA序列，利用ClustalXv1.83做序列的比对，分别在3’端和5’端找出保守序列用于设计扩增ITS区域的通用引物；3)使用通用引物分别对东方无线鳎和黑颊无线鳎的基因组DNA进行核糖体内转录ITS区扩增反应，得到两者扩增产物；4)分别对两者扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳分析，比较扩增产物长度，条带长的为黑颊无线鳎，条带短的为东方无线鳎。
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