[发明专利]一种5-苯基-1-(对甲基苯基)-1H-三唑与血清作用的差异蛋白检测方法有效
| 申请号： | 201811226159.X | 申请日： | 2018-10-19 |
| 公开（公告）号： | CN109187403B | 公开（公告）日： | 2021-07-23 |
| 发明（设计）人： | 何文英;吴禄勇;陈光英;冯华杰;刘荣强;段红叶 | 申请（专利权）人： | 海南师范大学 |
| 主分类号： | G01N21/33 | 分类号： | G01N21/33;G01N27/447;G01N33/68 |
| 代理公司： | 北京中济纬天专利代理有限公司 11429 | 代理人： | 于跃 |
| 地址： | 571158 *** | 国省代码： | 海南;46 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种5‑苯基‑1‑(对甲基苯基)‑1H‑三唑与血清作用的差异蛋白检测方法，包括：将血清样品与5‑苯基‑1‑(对甲基苯基)‑1H‑1,2,3‑三唑化合物混合；除去高丰度蛋白；Bradford法定量测定蛋白浓度；进行双向电泳实验；胶片图像处理及质谱鉴定等步骤。本发明还提供一种5‑苯基‑1‑(对甲基苯基)‑1H‑三唑的制备方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 苯基 甲基 血清 作用 差异 蛋白 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种5‑苯基‑1‑(对甲基苯基)‑1H‑1,2,3‑三唑与血清作用检测差异蛋白的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)将血清蛋白与5‑苯基‑1‑(对甲基苯基)‑1H‑1,2,3‑三唑化合物溶液混合均匀得样品a，恒温培养得样品b；(2)去除样品b中的高丰度蛋白得样品c；(3)用Bradford法对样品c的蛋白浓度进行定量；(4)进行双向电泳实验①按每胶条蛋白质上样量1.3mg，上样总体积为455uL的标准水化上样，进行第一向等电聚焦；②第一向等电聚焦完毕后，将胶条平衡后转到聚丙烯酰胺凝胶进行第二垂直电泳实验；③电泳结束后进行考马斯亮蓝染色，脱色，保存，扫描分析；(5)胶片图像处理及质谱鉴定①凝胶图像分析，筛选出表达异常的蛋白点并做上标记；②差异蛋白点的酶解及质谱鉴定；(6)结果利用ImageMaster5.0凝胶图像分析软件获得20个差异表达蛋白质点，再通过NCBInr的Blast的检索，确定了其中1‑16、18‑20号差异表达蛋白的信息见下表，![]()
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