[发明专利]一种基于UPLC-QTRAP技术快速同时检测样本中23种人参皂苷的方法

摘要

本发明公开了一种基于UPLC‑QTRAP技术快速同时检测样本中23种人参皂苷的方法，其包括，人参样本的预处理：向人参样本中加入70％的甲醇水溶液，超声提取，取上清；检测：调整液相色谱参数，色谱柱为Thermo C18柱，i.d.2.1×100mm，2.6μm流动相A为水，流动相B为乙腈，柱温为45℃；流速为0.35ml/min；并调整质谱参数。本发明实现了同时测定人参中23种人参皂苷，总分析时长11分钟，现有方法最多只能检测不超过19种人参皂苷，而且检测时间为120min，因此本发明扩展了现有方法的检测范围，显著提高了分析效率。

主权项

1.一种基于UPLC‑ QTRAP技术快速同时检测样本中22种人参皂苷的方法，其特征在于：包括，人参样本的预处理：向人参样本中加入70%的甲醇水溶液，超声提取，取上清；检测：调整液相色谱参数，色谱柱为Thermo C18柱，i.d.2.1×100 mm，2.6 μm流动相A为水，流动相B为乙腈，柱温为45℃；流速为0.35ml/min；并调整质谱参数；所述调整液相色谱参数，流动相梯度条件为：0min：95%流动相A、5%流动相B；10min：5%流动相A、95%流动相B；11min：5%流动相A、95%流动相B；11.1min：95%流动相A、5%流动相B；14min：95%流动相A、5%流动相B；所述调整质谱参数为：时间段3.5‑4.5min内：人参皂苷Rd定量离子对931.53→475.4，碰撞能量‑62V，驻留时间50ms；人参皂苷Re定量离子对945.55→783.5，碰撞能量‑40V，驻留时间50ms；人参皂苷Rg1定量离子对799.49→637.4，碰撞能量‑30V，驻留时间50ms；时间段4.50‑6min内：拟人参皂苷F1l定量离子对801.49→439.6，碰撞能量30V，驻留时间50ms；三七皂苷R2定量离子对769.48→475.3，碰撞能量‑50V，驻留时间100ms；拟人参皂苷‑RT5定量离子对655.43→457.2，碰撞能量‑20V，驻留时间50ms；人参皂苷Ro定量离子对955.50→793.4，碰撞能量‑20V，驻留时间50ms；人参皂苷Rg2定量离子对783.5→475.4，碰撞能量‑50V，驻留时间50ms；人参皂苷Rh1定量离子对637.44→475.4碰撞能量‑50V，驻留时间50ms；人参皂苷Rb1定量离子对1107.60→945.60，碰撞能量‑60V，驻留时间50ms；原人参二醇定量离子对459.39→401.1，碰撞能量‑20V，驻留时间50ms；人参皂苷Rc定量离子对1077.59→945.2，碰撞能量‑60V，驻留时间50ms；人参皂苷Rd定量离子对945.55→783.40，碰撞能量‑50V，驻留时间50ms；时间段6‑7.3min内：人参皂苷Rb2定量离子对1077.59→945.6，碰撞能量‑60V，驻留时间50ms；20(S)‑人参皂苷Rb3定量离子对1077.59→783.60，碰撞能量‑58V，驻留时间100ms；人参皂苷‑F1定量离子对637.44→475.1，碰撞能量‑30V，驻留时间100ms；人参皂苷F2定量离子对783.50→621.5，碰撞能量‑30V，驻留时间100ms；时间段7.3‑8min内：20(S)‑人参皂苷RG3定量离子对783.5→459.5，碰撞能量‑56V，驻留时间50ms；20(R)‑人参皂苷Rg3定量离子对783.5→459.5，碰撞能量‑59V，驻留时间50ms；时间段8‑10min内：原人参三醇定量离子对475.39→391.4，碰撞能量‑40V，驻留时间50ms；人参皂苷Rk1定量离子对765.49→603.2，碰撞能量‑40V，驻留时间50ms；人参皂苷k定量离子对621.44→459.3，碰撞能量‑30V，驻留时间50ms；还包括，使用4,4’‑亚甲基双（2‑氯苯胺）、对茴香胺、L‑酪氨酸甲酯、3‑氯苯胺、2，4‑二甲基喹啉、磺胺吡啶、阿特拉津、磺胺多辛、DL‑亮氨酸、N‑苯甲酰基‑L‑酪氨酸乙酯、6‑苯基‑2‑硫脲嘧啶、N‑(邻甲苯酰)甘氨酸、2‑甲基‑5‑硝基咪唑‑1‑乙醇、甘草次酸、黄烷酮、ε‑己内酯、2‑氨基吡啶的混合标样作为通用质控品，每次检测至少进两针通用质控品，根据谱图重叠情况分析检测仪器的状态；以质量比计，所述4,4’‑亚甲基双（2‑氯苯胺）：对茴香胺：L‑酪氨酸甲酯：3‑氯苯胺：2，4‑二甲基喹啉：磺胺吡啶：阿特拉津：磺胺多辛：DL‑亮氨酸：N‑苯甲酰基‑L‑酪氨酸乙酯：6‑苯基‑2‑硫脲嘧啶：N‑(邻甲苯酰)甘氨酸：2‑甲基‑5‑硝基咪唑‑1‑乙醇：甘草次酸：黄烷酮：ε‑己内酯：2‑氨基吡啶=1：0.5：0.5：2：1：0.4：0.1：0.1：0.2：0.5：0.5：1：1：0.1：0.5：2：0.2。