[发明专利]一种用于检测的组合物及检测方法在审
申请号: | 201811237061.4 | 申请日: | 2018-10-23 |
公开(公告)号: | CN109402232A | 公开(公告)日: | 2019-03-01 |
发明(设计)人: | 许文涛;罗云波;牛晨启;黄昆仑;徐瑗聪;杜再慧;贺晓云 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6858 | 分类号: | C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100083 北京市海淀*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供了一种用于检测的组合物及检测方法。本发明将传统MLPA中的填充序列换成一段与荧光探针序列一致的序列。由于这一巧妙的设计,本发明建立的F‑MLPA方法将现有MLPA方法变为可定量、可视化检测技术,且设计的荧光探针只能与探针连接产物的PCR产物相结合,避免了假阳性现象。在一个具体的实施例中,通过本发明设计的探针序列、Taqman荧光探针,和本发明建立的F‑MLPA方法,最终成功实现了转基因玉米MON810、转基因大豆GTS 40‑3‑2的特异性检测,检测的灵敏度均达到了1nM。此外,本发明建立的F‑MLPA方法和体系,是一种能够同时对外源特异基因和内参基因进行定量检测的多重PCR反应体系,可以实现转基因成分的准确定量检测。本发明为检测产品或方法的研发提供了一个新的平台和思路。 | ||
搜索关键词: | 检测 探针连接产物 荧光探针序列 多重PCR反应 可视化检测 特异性检测 转基因大豆 转基因玉米 定量检测 内参基因 探针序列 特异基因 荧光探针 准确定量 灵敏度 假阳性 转基因 研发 填充 成功 | ||
【主权项】:
1.一种组合物,其特征在于,所述组合物至少包括下述1)和2)所述的核酸序列:1)从5′→3′的连接方向,依次包括:5′端通用引物序列、与荧光探针的核苷酸序列一致的核苷酸序列、与部分和/或全部靶核苷酸序列的碱基互补结合的核苷酸序列;2)从5′→3′的连接方向,依次包括:与部分和/或全部靶核苷酸序列的碱基互补结合的核苷酸序列、3′端通用引物序列;且核酸序列的5′端的第一个核苷酸经过磷酸化修饰。
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