[发明专利]制备带有单链和双链分子标签的新一代测序接头的方法在审
申请号: | 201811247541.9 | 申请日: | 2018-10-25 |
公开(公告)号: | CN109355281A | 公开(公告)日: | 2019-02-19 |
发明(设计)人: | 郑贤杰;朱垚;曹振;秦雪梅;宋东亮 | 申请(专利权)人: | 翌圣生物科技(上海)有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人: | 冯子玲 |
地址: | 200120 上海市浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供一种制备带有单链和双链分子标签的新一代测序接头的方法,其特征在于,包括:步骤一:合成接头序列,接头序列包含第一序列和第二序列,其中,所述第二序列包括:限制性内切酶的保护碱基和19个随机碱基的双链分子标签,第一序列和第二序列中具有互补的序列片段,步骤二:接头序列退火,混匀第一序列和第二序列,在退火体系中按退火程序退火形成双链,步骤三:补齐步骤二中所形成的双链的接头,步骤四:酶切并回收接头。本发明的制备带有单链和双链分子标签的新一代测序接头的方法,能够制备携带有样本标签、单链分子标签和双链分子标签的接头。接头中含有更长的双链分子标签,为生息分析提供更好的信息基础;适用于多种测序平台。 | ||
搜索关键词: | 双链分子 标签 制备 退火 接头序列 新一代 测序 单链 双链 限制性内切酶 测序平台 单链分子 随机碱基 退火程序 信息基础 序列片段 补齐 混匀 碱基 酶切 样本 合成 回收 携带 分析 | ||
【主权项】:
1.一种制备带有单链和双链分子标签的新一代测序接头的方法,其特征在于,包括:步骤一:合成接头序列,接头序列包含第一序列和第二序列,其中,所述第二序列包括:限制性内切酶的保护碱基和19个随机碱基的双链分子标签,第一序列和第二序列中具有互补的序列片段,步骤二:接头序列退火,混匀第一序列和第二序列,在退火体系中按退火程序退火形成双链,步骤三:补齐步骤二中所形成的双链的接头,步骤四:酶切并回收接头。
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