[发明专利]一种高产L-亮氨酸的谷氨酸棒杆菌重组菌及其构建方法在审
申请号: | 201811256384.8 | 申请日: | 2018-10-26 |
公开(公告)号: | CN109294966A | 公开(公告)日: | 2019-02-01 |
发明(设计)人: | 张伟国;钱和;王颖妤 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/77;C12P13/06;C12R1/15 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 214000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种高产L‑亮氨酸的谷氨酸棒杆菌重组菌及其构建方法,属于基因工程领域。本发明应用基因工程方法,替换谷氨酸棒杆菌中NADP依赖型支链氨基酸转氨酶为来源于球形芽孢杆菌NAD依赖型亮氨酸脱氢酶LeuDH,构建新的、高效的L‑亮氨酸合成途径并解决谷氨酸棒杆菌L‑亮氨酸产生菌中NADH积累量过多,NADPH供应量不足的缺点,增强重组菌株中L‑亮氨酸合成能力并提高菌株积累NADPH的能力。重组菌经摇瓶发酵实验,L‑亮氨酸积累量达16.7g·L‑1,最大比生长速率为0.23g·L‑1·h‑1,高于出发菌株的13.2g·L‑1和0.18g·L‑1·h‑1。此发明成功改造了谷氨酸棒杆菌中L‑亮氨酸合成途径,改善了胞内辅因子不平衡的缺点,为选育L‑亮氨酸高产菌提供了新的思路。 | ||
搜索关键词: | 亮氨酸 谷氨酸棒杆菌 重组菌 构建 合成途径 依赖型 积累 支链氨基酸转氨酶 基因工程领域 亮氨酸脱氢酶 球形芽孢杆菌 应用基因工程 高产 出发菌株 合成能力 摇瓶发酵 重组菌株 产生菌 辅因子 高产菌 供应量 最大比 菌株 替换 生长 改造 成功 | ||
【主权项】:
1.一种谷氨酸棒杆菌重组菌,其特征在于,所述重组菌是在生产L‑亮氨酸的谷氨酸棒杆菌中异源表达了芽孢杆菌属来源的亮氨酸脱氢酶。
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