[发明专利]一种中药制剂的活性成分的筛选方法在审
| 申请号： | 201811257051.7 | 申请日： | 2018-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN109613233A | 公开（公告）日： | 2019-04-12 |
| 发明（设计）人： | 叶丽红;刘喜德;刘芳 | 申请（专利权）人： | 杭州市红十字会医院 |
| 主分类号： | G01N33/543 | 分类号： | G01N33/543;G01N33/531;G01N30/02 |
| 代理公司： | 上海脱颖律师事务所 31259 | 代理人： | 解文霞 |
| 地址： | 310003 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种中药制剂的活性成分的筛选方法，通过开环反应直接将凝血酶固定在磁珠上，制备得到凝血酶固定化磁珠，用于从复杂的丹参制剂中筛选出潜在的凝血酶抑制剂。本发明与其他方法相比，可以同时分离和富集键合的化合物，使其能够更敏感和快速的对化合物进行筛选，并提供了一种高选择性分离亲和化合物而避免繁琐的凝血酶固定化磁珠与目标分析物的制备方法。此外，原儿茶醛的凝血酶抑制活性为首次报道。方便的酶联技术表明，凝血酶固定化磁珠是一种用于从复杂的丹参制剂中鉴定生物活性化合物的新颖和可行的工具。 | ||
| 搜索关键词： | 凝血酶 磁珠 固定化 筛选 丹参制剂 中药制剂 制备 凝血酶抑制活性 凝血酶抑制剂 分离和富集 活性化合物 目标分析物 亲和化合物 高选择性 鉴定生物 开环反应 酶联技术 原儿茶醛 潜在的 键合 敏感 | ||
【主权项】：
1.一种凝血酶固定化磁珠的制备方法，包括如下步骤：1)取适量空白磁珠于离心管中，用缓冲液清洗；2)在离心管中加入凝血酶溶液，混合均匀；然后加入硫酸铵溶液，旋转孵育；3)孵育完成后，移除离心管中的上清液，然后清洗磁珠，最后把键合后的凝血酶固定化磁珠重新分散在缓冲液中保存。
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