[发明专利]柑橘衰退病毒微滴数字PCR定量检测试剂盒及方法在审
| 申请号： | 201811285052.2 | 申请日： | 2018-10-31 |
| 公开（公告）号： | CN109321680A | 公开（公告）日： | 2019-02-12 |
| 发明（设计）人： | 周彦;王瑛丽;杨真;王琴;刘莹洁 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院柑桔研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 重庆市前沿专利事务所(普通合伙) 50211 | 代理人： | 邹晓艳 |
| 地址： | 400712 重*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种柑橘衰退病毒微滴数字PCR定量检测试剂盒，包括总RNA提取试剂，引物CTV7、CTV6F和CTV6R，T7体外转录试剂盒，QX200 ddPCR EvaGreen supermix试剂盒。还公开了一种柑橘衰退病毒微滴数字PCR定量检测方法，包括如下步骤：(1)抽提总RNA；(2)用CTV7和CTV6R扩增总RNA，转录合成cRNA，用CTV6R对cRNA进行逆转录反应，获得cDNA；(3)以cDNA为模板，用CTV6F和CTV6R进行微滴数字ddPCR检测。本发明的ddPCR方法灵敏度高、特异性强，灵敏度比(RT‑)qPCR检测灵敏度高100倍。 | ||
| 搜索关键词： | 微滴 柑橘衰退病毒 数字PCR 定量检测试剂盒 灵敏度 试剂盒 总RNA 总RNA提取试剂 检测灵敏度 逆转录反应 转录 定量检测 特异性强 体外转录 抽提 扩增 引物 合成 检测 | ||
【主权项】：
1.一种柑橘衰退病毒微滴数字PCR定量检测试剂盒，其特征在于：包括总RNA提取试剂，引物CTV7、CTV6F和CTV6R，T7体外转录试剂盒，QX200 ddPCR EvaGreen supermix试剂盒，所述CTV7、CTV6F和CTV6R引物序列为：CTV7：5′‑TAATACGACTCACTATAGGGTCCGACTCTGATAACGATG‑3′，CTV6F：5′‑TCCGACTCTGATAACGATG‑3′，CTV6R：5′‑ACCGCTAAACGATACAAC‑3′。
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