[发明专利]DNA甲基转移酶及其可溶性异源表达和分离纯化方法有效
| 申请号： | 201811291824.3 | 申请日： | 2018-10-31 |
| 公开（公告）号： | CN109486779B | 公开（公告）日： | 2020-07-24 |
| 发明（设计）人： | 华跃进;李胜杰;王梁燕;蔡建玲 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 林松海 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种DNA甲基转移酶及其可溶性异源表达和分离纯化方法。本发明首次从耐辐射奇球菌中分离纯化出具有DNA甲基转移酶活性并且在缓冲液中可溶的N4‑Cytosine DNA甲基转移酶M.DraR1；同时还提供了该甲基转移酶的核苷酸序列和其克隆表达及分离纯化方法。本发明所提供的克隆表达及分离纯化方法可为其它DNA甲基转移酶或者限制性内切酶的开发应用提供方法学参考，对开发新型分子生物学的工具酶具有重要指导意义。 | ||
| 搜索关键词： | dna 甲基转移酶 及其 可溶性 表达 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】：
1.一种DNA甲基转移酶，其特征在于，编码所述DNA甲基转移酶的核苷酸序列包括：1）如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；2）与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列不同，但编码相同氨基酸序列的核苷酸序列；3）与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列具有80%以上的同源性，且编码的蛋白具有N4‑Cytosine DNA甲基转移酶活性的核苷酸序列；4）与1）、2）和3）中的核苷酸序列互补或杂交的核苷酸序列；所述的DNA甲基转移酶属α型N4‑Cytosine DNA甲基转移酶，可识别DNA保守序列为5’‑CCGCGG‑3’，并特异性甲基化修饰第二个胞嘧啶C的N4位，产生4mC类型甲基化修饰。
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