[发明专利]基于可循环使用SERS传感器的酪氨酸酶活性检测方法

摘要

本发明提供一种基于可循环使用SERS传感器的酪氨酸酶活性检测方法。其包括如下步骤：(a)提供表面增强拉曼散射(SERS)传感器，该传感器为一自组装电极，该电极上具有SERS活性的纳米金颗粒膜层，在纳米金颗粒膜层上具有拉曼信号分子；(b)建立酪氨酸酶活性检测指纹图谱及标准曲线；(c)获取所述SERS传感器与样品溶液中的酪氨酸酶反应后的表面增强拉曼光谱；(d)将步骤(c)获得的样品溶液的表面增强拉曼光谱与所述指纹图谱进行比较，并进行定性定量分析。(e)将检测后的传感器利用电化学调控实现可循环利用。本发明优点是，克服现有检测方法的技术不足，快速、灵敏地检测酪氨酸酶的活性并且传感器可循环使用有望实现对酪氨酸酶的自动化检测。

主权项

1.一种基于可循环使用SERS传感器的酪氨酸酶活性检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(a)提供一表面增强拉曼散射传感器，所述表面增强拉曼散射传感器为一自主装电极，在所述电极上具有表面增强拉曼活性的纳米金颗粒膜层，在所述纳米金颗粒膜层上具有拉曼信号分子；(b)建立酪氨酸酶活性检测指纹图谱及标准曲线：将所述表面增强拉曼散射传感器置于不同活性的酪氨酸酶的标准溶液中若干时间，取出并干燥后用拉曼光谱仪对所述表面增强拉曼散射传感器进行表面拉曼光谱的检测，获得所述表面增强拉曼散射传感器与不同活性的酪氨酸酶的标准溶液反应后的表面增强拉曼光谱，作为指纹图谱，并建立特征峰相对强度‑酪氨酸酶活性的对数的标准曲线；(c)获取所述表面增强拉曼散射传感器与样品溶液中的酪氨酸酶反应后的表面增强拉曼光谱：将所述表面增强拉曼散射传感器置于具有酪氨酸酶的样品溶液中若干时间，取出并干燥后用拉曼光谱仪对所述表面增强拉曼散射传感器进行表面拉曼光谱的检测，获得所述表面增强拉曼散射传感器与样品溶液反应后的表面增强拉曼光谱，其中所述表面增强拉曼散射传感器置于具有酪氨酸酶的样品溶液中的时间与步骤(b)中所述表面增强拉曼散射传感器置于不同活性的酪氨酸酶的标准溶液中的时间相同；(d)将步骤(c)获得的样品溶液的表面增强拉曼光谱与所述指纹图谱进行比较，定性分析该样品溶液中是否存在酪氨酸酶，并将表面增强拉曼光谱的特征峰的相对强度与所述标准曲线进行比较，定量分析得到样品溶液中的酪氨酸酶的活性；(e)将检测酪氨酸酶活性后的表面增强拉曼散射传感器利用电化学调控实现可循环利用：对检测酪氨酸酶活性后的表面增强拉曼散射传感器施加一恒定电位，并持续若干时间，以对所述表面增强拉曼散射传感器进行调节，实现对表面增强拉曼散射传感器的回收利用。