[发明专利]一种15N代谢标记蛋白质结合质谱平行反应监测定量的方法在审

专利信息
申请号: 201811314764.2 申请日: 2018-11-06
公开(公告)号: CN109444279A 公开(公告)日: 2019-03-08
发明(设计)人: 陆天聪 申请(专利权)人: 北京蛋白世界生物科技有限公司
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/88
代理公司: 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 代理人: 苏友娟
地址: 100020 北京市朝阳区*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种15N代谢标记蛋白质结合质谱平行反应监测定量的方法,15N代谢标记的内参蛋白可以准确地反映待检测内源蛋白的结构、状态,与待检测蛋白具有相同的酶解效率,解决了质谱选择追踪定量过程中内参肽离子强度信号受蛋白酶消化、共洗脱基质、样品组成、仪器状态等影响导致的不重现问题,同时提高质谱平行反应监测定量的效率;另外,本发明提供的方法可以产生多种用于平行反应监测的定量多肽,提高了定量准确性并降低合成多肽的成本,且该方法能够用于定量蛋白组学研究、对蛋白标志物的检测,医疗诊断、环境卫生,食品安全检测,司法鉴定等有很大的帮助。
搜索关键词: 反应监测 质谱 平行 代谢标记 蛋白质结合 检测 食品安全检测 司法鉴定 蛋白标志物 蛋白酶消化 定量准确性 蛋白组学 定量过程 合成多肽 酶解效率 内参蛋白 内源蛋白 强度信号 样品组成 医疗诊断 仪器状态 环境卫生 多肽 基质 洗脱 内参 离子 蛋白 重现 追踪 帮助 研究
【主权项】:
1.一种15N代谢标记蛋白质结合质谱平行反应监测定量的方法,其特征在于,包括以下步骤:a)以15N代谢标记内参蛋白,得到15N标记的蛋白;b)向待测样品中加入步骤a)得到的15N标记的蛋白,并进行电泳,得到蛋白凝胶;c)将步骤b)得到的蛋白凝胶进行胶内酶解,得到酶解样品;d)将步骤c)得到的酶解样品进行质谱检测,并将质谱检测结果通过PRM进行定量分析。
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