[发明专利]一种提高烟叶提取物中氧化酶酶活的提取方法在审

专利信息
申请号: 201811346921.8 申请日: 2018-11-13
公开(公告)号: CN109321536A 公开(公告)日: 2019-02-12
发明(设计)人: 徐国云;翟妞;周会娜;张慧;陈千思;刘萍萍;郑庆霞;许亚龙;王晨;李晶 申请(专利权)人: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
主分类号: C12N9/02 分类号: C12N9/02;C12N9/08
代理公司: 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 代理人: 时立新
地址: 450001 *** 国省代码: 河南;41
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 本申请属于烟草代谢物技术领域,具体涉及一种提高烟叶提取物中氧化酶酶活的提取方法专利申请事宜。该方法针对新鲜烟叶中氧化酶的提取,具体包括:制备提取液(采用裂解液RIPA、缓冲液NEB或PBS)、烟叶预处理、溶液法提取等步骤。初步测定结果表明,提取液中SOD酶活得到了较好提高,可达3.7U/μg全蛋白,POD酶活可达6.3×10‑3U/μg全蛋白,而COX酶活可达5.1×10‑3U/μg全蛋白,较好达到了减少杂质蛋白干扰、提升氧化酶含量的目的。同时由于相关提取方法简单快速、耗时较短(仅1.5 h左右),因此使得本申请具有较好的科研价值,可为相关酶活性分析及其它相关蛋白分析和研究奠定技术基础。
搜索关键词: 氧化酶 全蛋白 酶活 烟叶提取物 提取液 申请 酶活性分析 烟叶预处理 蛋白分析 技术基础 新鲜烟叶 杂质蛋白 代谢物 缓冲液 裂解液 溶液法 制备 耗时 烟草 科研 研究
【主权项】:
1.一种提高烟叶提取物中氧化酶酶活的提取方法,其特征在于,该方法针对新鲜烟叶中氧化酶的提取,具体包括如下步骤:(1)制备提取液,具体采用裂解液RIPA、缓冲液NEB或PBS;配方组成为:裂解液RIPA :pH 8.0的Tris‑Cl、50 mM,EDTA、1mM,SDS、0.1%,NaCl、150 mM,NP‑40、1%,PMSF、1 mM;缓冲液NEB: pH 7.5的Hepes、20mM,KCl、40 mM,EDTA、1 mM,PMSF、1 mM;(2)烟叶预处理将栽培烟草8‑12叶期的新鲜烟叶研磨粉碎;(3)溶液法提取在步骤(2)研磨成粉烟叶样品中加入步骤(1)中制备的提取液,震荡混匀后,冰上静置不少于1h;具体用量方面,研磨成粉烟叶样品100mg,提取液用量为500μl~1mL;静置完成后,5000~15000rpm离心不少于20min,保留上清液,即为氧化酶的提取液。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国烟草总公司郑州烟草研究院,未经中国烟草总公司郑州烟草研究院许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201811346921.8/,转载请声明来源钻瓜专利网。

×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top