[发明专利]一种同时产五种稻曲病菌毒素的稻曲病菌的鉴定方法在审
| 申请号： | 201811351429.X | 申请日： | 2018-11-14 |
| 公开（公告）号： | CN109355417A | 公开（公告）日： | 2019-02-19 |
| 发明（设计）人： | 林晓燕;牟仁祥;曹赵云;曹珍珍;马有宁;陈铭学 | 申请（专利权）人： | 中国水稻研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6806;C12Q1/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 昆明合众智信知识产权事务所 53113 | 代理人： | 钱磊 |
| 地址： | 310006 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种产稻曲病菌毒素的稻曲病菌的鉴定方法，尤其是一种同时产五种稻曲病菌毒素A、B、C、D和F的稻曲病菌的鉴定方法。通过菌落形态观察、孢子形态鉴定、分子生物学鉴定三部分对稻曲病菌进行鉴定。上述方法，对目标菌种有效的鉴定，确定分离方法的有效性，通过三部分鉴定，鉴定的准确性非常高。 | ||
| 搜索关键词： | 稻曲病菌 病菌毒素 种稻 分子生物学鉴定 菌落形态 目标菌种 孢子形态 毒素 观察 | ||
【主权项】：
1.一种同时产稻曲病菌毒素A、B、C、D和F的稻曲病菌的鉴定方法，其特征在于，所述鉴定方法包括：分子鉴定：将纯化并处于保藏状态的菌株拿到室温状态进行菌种解冻，将解冻后的菌种接种到新鲜配制的无菌PSA平板上进行活化，从PSA分离平板上挑取活化后的菌株接种于PS液体培养基中，于150r/min、28℃条件中培养7天后，用离心管收集菌丝，采用真菌基因组提取试剂盒提取菌丝总DNA，nanodrop 2000C超微量分光光度计DNA纯度后，利用真菌18S引物进行PCR扩增，扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，再利用PCR回收试剂盒回收纯化得到目的片段，然后将扩增产物进行序列分析，返回得到测序结果，将测序结果在NCBI网站上利用Blast软件进行核酸序列比对分析，根据筛选到的菌株序列与稻曲病菌属菌株序列的同源性判断筛选到的菌株是否为稻曲病菌。
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