[发明专利]一种类角膜上皮细胞、组织工程化角膜上皮及制备与应用有效

专利信息
申请号: 201811354122.5 申请日: 2018-11-14
公开(公告)号: CN109517784B 公开(公告)日: 2020-03-06
发明(设计)人: 杨学义;郭燕杰;马西亚;张沛 申请(专利权)人: 洛阳师范学院
主分类号: C12N5/071 分类号: C12N5/071;C12N5/079;A61L27/36;A61L27/38
代理公司: 洛阳九创知识产权代理事务所(普通合伙) 41156 代理人: 炊万庭
地址: 471000 *** 国省代码: 河南;41
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摘要: 发明属于组织工程技术领域,具体涉及一种以类角膜上皮细胞为种子细胞构建组织工程化角膜上皮的方法与应用。本发明提供了一种采用两步法诱导皮肤来源的表皮细胞转分化为类角膜上皮细胞,以诱导获得的类角膜上皮细胞为种子细胞替代角膜缘干细胞构建组织工程化角膜上皮,制得的组织工程化角膜上皮,具有透明度良好,弹性好,可操作性强等特点,可用于移植修复人类或动物因角膜缘干细胞缺损导致视力严重下降或失明的眼表,用于因角膜缘干细胞缺损而失明的动物模型的自体移植和同种异体移植均能取得良好的效果。
搜索关键词: 种类 角膜 上皮细胞 组织 工程 上皮 制备 应用
【主权项】:
1.一种类角膜上皮细胞的制备方法,其特征在于包含如下步骤:(1)以人或哺乳动物皮肤表皮细胞为种子细胞,采用含终浓度为30~50μg/mL EGF和20~30ng/mL LIF的无血清培养基诱导培养10~24h,使表皮细胞去分化、回到较原始的状态,得到去分化的表皮细胞;(2)将步骤(1)制得的去分化的表皮细胞与人或哺乳动物角膜基质成纤维细胞采用transwell共培养系统进行共培养,培养3~5天,使皮肤表皮细胞向角膜上皮细胞分化,得到类角膜上皮细胞。
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