[发明专利]一种卷烟烟气小鼠口鼻暴露方法

摘要

本发明涉及一种卷烟烟气小鼠口鼻暴露方法，属于生物应用技术领域。该方法包括卷烟烟气抽吸、烟气稀释、参考孔和检测孔设置、小鼠暴露、采样、检测孔数据标准化、时间变异系数计算、空间变异系数计算、判定等步骤。本发明的方法操作简单，对卷烟烟气在暴露周期内浓度以时间和空间两个方面作为切入点，建立卷烟烟气口鼻暴露系统的相关参数，验证烟气口鼻暴露体系中烟气颗粒物的浓度及其粒径分布特征的均一性和稳定性，为后续生物学效应的科学性和准确性提供保证。

主权项

1.一种卷烟烟气小鼠口鼻暴露方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤（1），卷烟烟气抽吸：每支烟抽吸持续时间2‑5s，抽吸频率30‑60s，抽吸容量35.0‑50ml/2s，抽吸口数4‑6口，得到卷烟烟气；步骤（2），烟气稀释：将步骤（1）得到的卷烟烟气与洁净空气按体积比为1:10‑1:100的配比稀释混匀，后进入口鼻式暴露系统；所述的洁净空气是空气经高效空气过滤器过滤所得；步骤（3），参考孔和检测孔设置：在口鼻式暴露系统上，选择一个采样孔作为参考孔，同时，随机选择多个采样孔作为检测孔；步骤（4），小鼠暴露：将小鼠束缚在固定筒中适应15‑30min后，将装有小鼠的固定筒安装在口鼻式暴露系统上除了采样孔的其余孔对应的位置上，内缸正压烟气气流进入动物鼻部，呼出气流从侧面被吸入外缸，平衡至少10min后进行采样；步骤（5），采样：通过步骤（3）选择好的参考孔和检测孔进行采样，之后测量所采样品的烟气颗粒物的浓度和粒径中值；连续多天进行采样测量，每天采样测量多次；步骤（6），检测孔数据标准化：将步骤（5）检测孔所测量得到的烟气颗粒物的浓度除以参考孔烟气颗粒物的浓度，得到检测孔标准化烟气颗粒物的浓度数据；将步骤（5）检测孔所测量得到的烟气颗粒物的粒径中值除以参考孔烟气颗粒物的粒径中值，得到检测孔标准化烟气颗粒物粒径中值数据；步骤（7），时间变异系数计算：计算每次采样测量得到的浓度的时间变异系数CVij和粒径中值的时间变异系数GVij；计算公式如下：CVij=（所有检测孔第i天第j次采样测量得到的标准化烟气颗粒物的浓度数据的标准差/所有检测孔第i天第j次采样测量得到的标准化烟气颗粒物的浓度数据的均值）×100%，CVij为第i天第j次采样的浓度的时间变异系数；GVij=（所有检测孔第i天第j次采样测量得到的标准化烟气颗粒物的粒径中值数据的标准差/所有检测孔第i天第j次采样测量得到的标准化烟气颗粒物的粒径中值数据的均值）×100%，GVij为第i天第j次采样的粒径中值的时间变异系数；步骤（8），空间变异系数计算：计算出口鼻式暴露系统烟气颗粒物的浓度的空间变异系数CVij空间和粒径中值的空间变异系数GVij空间；计算公式如下：(CVij空间)2 =(CV总变异)2‑(CVij)2其中，CV总变异=所有检测孔所有采样次数得到的标准化烟气颗粒物的浓度数据的标准差/所有检测孔所有采样次数得到的标准化烟气颗粒物的浓度数据的均值×100%；CVij空间为第i天第j次采样的浓度的空间变异系数；(GVij空间)2 =(GV总变异)2‑(GVij)2其中，GV总变异=所有检测孔所有采样次数得到的标准化烟气颗粒物的粒径中值数据的标准差/所有检测孔所有采样次数得到的标准化烟气颗粒物的粒径中值数据的均值×100%；GVij空间为第i天第j次采样的粒径中值的空间变异系数；步骤（9），判定：当所有的CVij和GVij均小于10%，且所有的CVij空间和GVij空间均小于10%，则说明步骤（1）、步骤（2）和步骤（4）的构成的暴露方法适合作为研究烟气暴露啮齿类动物生物学效应的暴露方法；反之，则不适合作为研究烟气暴露啮齿类动物生物学效应的暴露方法，需要增加洁净空气的流量和/或调节卷烟烟气发生量，直至所有的CVij、GVij、CVij空间和GVij空间均小于10%。