[发明专利]一种杆菌肽高产菌株的高通量筛选方法在审
| 申请号： | 201811364386.9 | 申请日： | 2018-11-16 |
| 公开（公告）号： | CN109439581A | 公开（公告）日： | 2019-03-08 |
| 发明（设计）人： | 周景文;陈坚;米粱波;王得明;姜玉国;曾伟主;堵国成;李俊 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N1/02;C12R1/10 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种杆菌肽高产菌株的高通量筛选方法，属于微生物技术领域。本发明方法能够快速精准地从大量菌株中筛选获得高产杆菌肽的菌株。本发明通过高通量筛选，ARTP诱变处理系统和杆菌肽显色反应结合使用，简化了整个筛选过程和提高了筛选效率，获得了一株杆菌肽的高产量诱变菌株，相比于原始出发菌株，诱变菌株的杆菌肽产量在摇瓶上提高10.8％。 | ||
| 搜索关键词： | 杆菌肽 高通量筛选 高产菌株 诱变菌株 筛选 菌株 微生物技术领域 原始出发菌株 获得高产 快速精准 显色反应 诱变处理 摇瓶 | ||
【主权项】：
1.一种杆菌肽高产菌株的高通量筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将待筛选的地衣芽孢杆菌菌株涂布在固体平板培养基上，待菌落形成后挑选接种于高通量种子培养基中培养；(2)将步骤(1)中得到的培养液转接至发酵培养基中发酵；(3)发酵结束后，将步骤(2)中得到的发酵液与三氯醋酸溶液混合静置沉淀后，离心取上清，并将上清与双缩脲试剂混合显色，立即用酶标仪测定显色液的OD548，OD548越高，菌株的杆菌肽生产能力越强；(4)选取步骤(3)中得到的杆菌肽产量相对较高的菌株多株，进行复筛；步骤(1)所述培养、步骤(2)所述发酵、步骤(3)所述离心、步骤(3)所述显色、步骤(3)所述酶标仪检测均在高通量孔板上进行。
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