[发明专利]一种基于转基因技术的人工创制矮化西瓜新品种的方法在审
| 申请号： | 201811376541.9 | 申请日： | 2018-11-19 |
| 公开（公告）号： | CN109468322A | 公开（公告）日： | 2019-03-15 |
| 发明（设计）人： | 董薇;吴德峰;黄甜;张海燕;王子成 | 申请（专利权）人： | 河南大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/82;C12N15/66;A01H5/00;A01H6/34 |
| 代理公司： | 苏州知途知识产权代理事务所(普通合伙) 32299 | 代理人： | 张锦波;时萌萌 |
| 地址： | 47500*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于转基因技术的人工创制矮化西瓜新品种的方法，包括含有西瓜GlaGA20ox基因序列的RNA干扰载体及其构建方法，RNA干扰载体的构建步骤如下：根据GlaGA20ox基因序列信息，克隆获得正向序列及反向序列，将正向序列及反向序列插入DHpart27RNAiFADp1P4载体中，获得RNA干扰载体；创制矮化西瓜新品种的方法为：将RNA干扰载体转化到西瓜细胞中，并通过抗生素筛选获得阳性转化植株；利用检测引物，通过PCR技术对阳性转化植株中卡那霉素基因区域进行扩增，扩增产物连入T载体后进行DNA测序，以确认西瓜阳性植株。本发明可实现对西瓜中GlaGA20ox基因进行定点突变，获得基因功能缺失的矮化西瓜。 | ||
| 搜索关键词： | 矮化 西瓜 西瓜新品种 转基因技术 反向序列 正向序列 转化植株 构建 基因序列信息 卡那霉素基因 抗生素筛选 定点突变 基因功能 基因序列 检测引物 扩增产物 阳性植株 扩增 克隆 细胞 基因 转化 | ||
【主权项】：
1.一种含有西瓜GlaGA20ox基因序列的RNA干扰载体DHpart27RNAiFADp1P4‑GlaGA20ox的构建方法，其特征在于，构建步骤如下：根据西瓜的GlaGA20ox基因序列信息，克隆获得正向序列及反向序列，然后将克隆获得的正向序列及反向序列插入DHpart27RNAiFADp1P4载体中，获得RNA干扰载体DHpart27RNAiFADp1P4‑GlaGA20ox，所述GlaGA20ox基因序列如SEQ IDNo.1所示。
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