[发明专利]用于检测EGFR突变的组合物、试剂盒和方法

摘要

本发明公开用于检测EGFR突变的组合物、试剂盒和方法。组合物包含正向引物、反向引物和野生型EGFR基因结合分子，且正向引物和反向引物的组合能够得到包含EGFR突变位置的扩增产物。正向引物包括5’端区域、3’端区域和中间区域，5’端区域的两侧序列能够进行互补形成茎环结构，在5’端区域的第一末端具有荧光基团和第二末端具有淬灭基团，3’端区域的3’端最后一个碱基与待检测的突变碱基互补。反向引物包括位于5’端的标签序列和能够与待检测的突变位置的下游部分序列完全互补的结合区域。野生型EGFR基因结合分子设置为能够特异性识别并结合至野生型EGFR基因的待测突变位置。提高了EGFR检测的灵敏度和特异性。

主权项

1.一种用于检测EGFR突变的组合物，其特征在于，包含正向引物、反向引物和野生型EGFR基因结合分子，且所述正向引物和所述反向引物的组合能够得到包含EGFR突变位置的扩增产物，其中：所述正向引物包括5’端区域、3’端区域以及位于所述5’端区域和所述3’端区域之间的中间区域，所述5’端区域包含第一侧序列、第二侧序列和环形区，且所述第一侧序列和第二侧序列能够进行第一互补，从而形成茎环结构，在所述5’端区域的第一末端具有荧光基团和第二末端具有淬灭基团，所述3’端区域的3’端最后一个碱基与待检测的突变碱基互补，所述中间区域设置为使所述5’端区域和所述3’端区域相对分开；所述反向引物包括位于5’端的标签序列和能够与待检测的突变位置的下游的一部分序列完全互补的结合区域；和所述野生型EGFR基因结合分子设置为能够特异性识别并结合至野生型EGFR基因的至少待测突变位置。