[发明专利]一种可以产2’-岩藻基乳糖菌株的构建方法在审
| 申请号： | 201811386458.X | 申请日： | 2018-11-20 |
| 公开（公告）号： | CN109609422A | 公开（公告）日： | 2019-04-12 |
| 发明（设计）人： | 胡学超;史静 | 申请（专利权）人： | 安徽天凯生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京盛凡智荣知识产权代理有限公司 11616 | 代理人： | 蔡奂 |
| 地址： | 239000 安徽省滁州*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明涉及大肠杆菌菌株技术领域，具体是指一种可以产2’‑岩藻基乳糖菌株的构建方法，包括以下步骤：(1)提供一种2’‑岩藻基乳糖产量高，可以大幅度提高2’‑岩藻基乳糖的含量的大肠杆菌菌株E.coli K‑12 ZK‑2；(2)构建大肠杆菌菌株E.coli K‑12 ZK‑2，采用CRISPR/CAS9系统对大肠杆菌基因进行敲除，得到敲除菌株；(3)将与2’‑岩藻基乳糖代谢途径相关的基因构建到表达质粒中，导入敲除株内进行2’‑岩藻基乳糖相关基因的表达；(4)发酵后，通过提取、超滤、浓缩和分离等获得2’‑岩藻基乳糖。本发明与现有技术相比的优点在于：为将来用于婴幼儿配方奶粉中提供了可能，并且可以大幅度降低生产成本。 | ||
| 搜索关键词： | 乳糖 岩藻 大肠杆菌菌株 构建 菌株 敲除 婴幼儿配方奶粉 大肠杆菌基因 表达质粒 基因构建 乳糖代谢 相关基因 超滤 发酵 浓缩 | ||
【主权项】：
1.一种可以产2’‑岩藻基乳糖菌株的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提供一种2’‑岩藻基乳糖产量高，可以大幅度提高2’‑岩藻基乳糖的含量的大肠杆菌菌株E.coli K‑12 ZK‑2；(2)构建大肠杆菌菌株E.coli K‑12 ZK‑2，采用CRISPR/CAS9系统对大肠杆菌基因进行敲除，得到敲除菌株；(3)将与2’‑岩藻基乳糖代谢途径相关的基因构建到表达质粒中，导入敲除株内进行2’‑岩藻基乳糖相关基因的表达；(4)发酵后，通过提取、超滤、浓缩和分离等获得2’‑岩藻基乳糖。
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