[发明专利]一种粉防已的组织培养技术

摘要

本发明公开了一种粉防已的组织培养技术，涉及粉防已通过离体快繁技术获得优质种苗的育苗方法。本发明以粉防已带芽茎段为外植体，经过外植体消毒、丛生芽诱导、生根培养、炼苗移栽等过程从而建立了粉防已组织培养快速繁殖体系，加速粉防已良种的推广和资源开发利用具有重要的现实意义。

主权项

1.一种粉防已的组织培养技术，其特征在于包括以下步骤：步骤1，丛生芽诱导：选取生长健壮无病虫的幼树当年生的带芽茎段作为外植体,用洗洁精水溶液浸泡14min，然后用自来水冲洗35min，擦干表面水分后备用,在超净工作台中以70%～80%乙醇浸泡14s，0.1%升汞溶液消毒25min，再用无菌水清洗8次，擦干后切成长度为1.5cm的茎段接种到诱导培养基上,先在30℃条件下全暗培养25天，然后置于每天光照15小时，光照强度为900lx，培养温度为30℃条件下培养，直至诱导形成丛生芽；诱导培养基为：MS+6mg/L6‑BA+2mg/L NAA+0.9mmol/L La(NO3)2+3.9%蔗糖+0.9%琼脂+0.15%活性炭，pH值为5.9;步骤2，增殖培养：将步骤1所得的丛生芽转入增殖培养基上进行增殖培养，接种后先在30℃条件下全暗培养直至叶腋处萌生一个侧芽，然后置于每天光照16小时，光照强度为900lx，培养温度为30℃的条件下培养直至各丛生芽伸长到5cm；增殖培养基为：MS+3mg/L6‑BA+0.9mg/L NAA+3.9%蔗糖+0.8%琼脂+0.2%活性炭，pH值为5.9;步骤3，生根培养：将步骤1或步骤2所获得的高度约为5cm的丛生芽芽切割并接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在30℃条件下全暗培养10天，然后置于每天光照15小时，光照强度为1900lx，培养温度为30℃的条件下培养至生根；生根培养基为：1/2MS+4mg/L NAA+3.9%蔗糖+0.9%琼脂+0.2%活性炭，pH值为5.9;步骤4，炼苗移栽：粉防已瓶内生根33天后，置于自然光照下炼苗8天后，洗净根部培养基，移栽由黄心土：河沙＝3：2混合成的基质中。