[发明专利]一种重组减毒沙门氏菌LH430及其制备方法和用途有效
| 申请号： | 201811405595.3 | 申请日： | 2018-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN109439686B | 公开（公告）日： | 2022-07-01 |
| 发明（设计）人： | 金天明;李昕;王小月;李丹;蓝肇煜;孟佳丽;尚翠玲;林静;高珂珂;李小慧 | 申请（专利权）人： | 天津农学院 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N1/21;A61K35/74;A61K38/17;A61K47/42;A61P35/00;C12R1/42 |
| 代理公司： | 天津市鼎和专利商标代理有限公司 12101 | 代理人： | 李凤 |
| 地址： | 30038*** | 国省代码： | 天津;12 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种重组减毒沙门氏菌LH430及其制备方法和用途，利用蜂毒肽MEL基因和肿瘤靶向肽RGD基因，将目的基因克隆到pMD‑18‑T载体中，线性化重组穿梭载体后构建重组真核表达载体pEGFP‑RGD‑MEL，将其转化至感受态LH430，构建了包含上述目的基因的重组减毒沙门氏菌LH430；用重组减毒沙门氏菌LH430侵染黑色素瘤细胞B16，使其表达RGD‑MEL基因；评价RGD‑MEL基因共表达的减毒沙门氏菌LH430对B16细胞的抑瘤效果。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 沙门氏菌 lh430 及其 制备 方法 用途 | ||
【主权项】：
1.一种重组减毒沙门氏菌LH430的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)根据蜂毒肽基因序列GI:AY745248.1优化得到的在小鼠体内高效表达的MEL基因SEQ ID NO.6；根据肿瘤靶向肽蛋白序列PI:1FUL_A和蜂毒肽基因序列GI:AY745248.1优化得到的在小鼠体内高效表达的RGD‑MEL基因SEQ ID NO.5；2)MEL基因、RGD‑MEL基因PCR扩增：以MEL‑F SEQ ID NO.1和MEL‑R SEQ ID NO.2为引物，扩增MEL基因；以RGD‑MEL‑F SEQ ID NO.3和RGD‑MEL‑R SEQ ID NO.4为引物，扩增RGD‑MEL基因；3)将获得的目的基因克隆到pMD‑18‑T载体中，线性化重组穿梭载体后构建重组真核表达载体pEGFP‑RGD‑MEL，并用其转化感受态LH430，构建了包含上述目的基因的重组减毒沙门氏菌LH430。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于天津农学院，未经天津农学院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201811405595.3/，转载请声明来源钻瓜专利网。
