[发明专利]丙酮酸氧化酶的固定化方法有效
| 申请号： | 201811409331.5 | 申请日： | 2018-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN109234259B | 公开（公告）日： | 2022-02-22 |
| 发明（设计）人： | 董维亮;周鑫海;周杰;徐宁;杨璐;姜岷 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12N11/096 | 分类号： | C12N11/096;C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70 |
| 代理公司： | 江苏致邦律师事务所 32230 | 代理人： | 徐蓓;尹妍 |
| 地址： | 211816 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了丙酮酸氧化酶的固定化方法，采用聚赖氨酸载体将丙酮酸氧化酶固定在电极上。采用本发明的方法固定化丙酮酸氧化酶，可提高丙酮酸氧化酶约20%活力，获得的固定化丙酮酸氧化酶酶活高，对pH、温度的耐受性好，对后续生物传感器的开发与应用具有重要的指导意义。 | ||
| 搜索关键词： | 丙酮酸 氧化酶 固定 方法 | ||
【主权项】：
1.一种丙酮酸氧化酶的固定化方法，其特征在于，包括如下步骤：1）采用层层滴涂的修饰方法，将清洁的Pb电极置于硝酸和重铬酸钾的混合溶液中，利用循环伏安法扫描一圈，进行电化学氧化处理；2）在步骤1）获取的电极上固定碳二亚胺EDC；3）将固定EDC的电极置于聚赖氨酸溶液中，EDC和聚赖氨酸交联反应生成修饰膜；4）将步骤3）获取的修饰电极在常温下干燥，之后将丙酮酸氧化酶酶液与EDC溶液混合后滴定于电极表面。
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