[发明专利]一种新的提取噬菌体基因组DNA的方法在审
| 申请号： | 201811416963.4 | 申请日： | 2018-11-26 |
| 公开（公告）号： | CN109371011A | 公开（公告）日： | 2019-02-22 |
| 发明（设计）人： | 杨洪江;张茜茜;黄志伟;张志强;李东航 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人： | 赵瑶瑶 |
| 地址： | 300457 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种新的提取噬菌体基因组DNA的方法，包括以下步骤：噬菌体裂解液扩增后，去除细胞碎片，去除宿主菌的核酸物质，加入PEG6000使噬菌体沉降，使用TM缓冲液重悬后，不使用氯仿抽提，直接加入核酸酶，去除未除尽的宿主菌的基因组，然后使用尿素代替蛋白酶K，使外壳蛋白变性后，通过琼脂糖凝胶电泳使蛋白与基因组DNA分开，然后使用冻融回收的方法，回收噬菌体的基因组DNA。此方法操作简便，特别适用于对氯仿敏感的噬菌体，适用范围更广，大大减少实验成本，缩短提取时间。 | ||
| 搜索关键词： | 噬菌体 去除 噬菌体基因组 基因组DNA 宿主菌 琼脂糖凝胶电泳 噬菌体裂解液 回收 核酸物质 缓冲液重 氯仿抽提 实验成本 外壳蛋白 细胞碎片 蛋白酶K 沉降 核酸酶 基因组 变性 冻融 扩增 氯仿 尿素 蛋白 敏感 | ||
【主权项】：
1.一种新的噬菌体基因组DNA的提取方法，其特征在于：浓缩噬菌体颗粒步骤中，去除细胞碎片，去除宿主菌的核酸物质，加入PEG6000使噬菌体沉降，TM缓冲液重悬噬菌体；直接采用尿素变性剂分离噬菌体基因组DNA；通过琼脂糖凝胶电泳的方法，将噬菌体基因组DNA与蛋白及其他杂质分开；采用低温冷冻含基因组DNA的凝胶，室温融化后过滤获得噬菌体基因组DNA溶液。
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