[发明专利]一种通过遗传改造提高裂殖壶藻ATCC20888油脂和DHA含量的方法有效
| 申请号： | 201811423642.7 | 申请日： | 2018-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN109517834B | 公开（公告）日： | 2022-06-07 |
| 发明（设计）人： | 张卫文;王方忠;陈磊;刘璐 | 申请（专利权）人： | 昆明藻能生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/80 | 分类号： | C12N15/80 |
| 代理公司： | 昆明今威专利商标代理有限公司 53115 | 代理人： | 赛晓刚 |
| 地址： | 650108 云南省昆明市五华区科发路139号*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明公开一种通过遗传改造获得高油脂和DHA含量的裂殖壶藻ATCC20888突变藻种的方法。包含如下步骤：（1）过表达来源于隐甲藻的苹果酸酶提高裂殖壶藻ATCC20888还原力，获得高产油脂的突变藻种；（2）以上一步获得的藻种为出发藻种，过表达来源于高山被孢霉菌的延长酶，将十六碳转化为十八碳，解除对乙酰辅酶A羧化酶的抑制作用，提高前体供给，进一步提高油脂含量的同时，提高DHA占细胞干重的比例。利用本发明的方法对裂殖壶藻藻种进行遗传改造，获得的裂殖壶藻突变藻种与出发藻种相比，油脂占细胞干重比例提高48.63%，其含量达到藻体干重的71.68%；DHA占细胞干重比例提高38.69%，其含量达到藻体干重的26.70%。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 通过 遗传 改造 提高 裂殖壶藻 atcc20888 油脂 dha 含量 方法 | ||
【主权项】：
1.一种通过遗传改造提高裂殖壶藻ATCC20888油脂和DHA含量的方法，其特征在于：基于通过表达特定酶的功能，提高细胞内还原力和油脂合成前体的供给，获得高产油脂和DHA含量的藻种，具体操作包括：(1)构建含有来源于隐甲藻的高效苹果酸酶基因的过表达盒；(2)将含有高效苹果酸酶基因表达盒转化进入裂殖壶藻ATCC20888藻种，在富集培养基中测试其油脂和DHA含量；(3)构建来源于高山被孢霉菌的高效延长酶基因的过表达盒；(4)以上一步获得的藻种为出发藻种，将含有延长酶基因的表达和转化进入藻体内，获得最终突变藻种；(5)在富集培养基中对获得最终突变藻种进行油脂和DHA含量的检测，鉴定突变藻种油脂和DHA含量情况。
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