[发明专利]一种敲除酿酒酵母菌HO基因的方法在审
| 申请号： | 201811434012.X | 申请日： | 2018-11-28 |
| 公开（公告）号： | CN109402162A | 公开（公告）日： | 2019-03-01 |
| 发明（设计）人： | 应汉杰;奚迅;陈勇;杨乐云;刘娜;任培芳;孙文俊 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N15/90;C12N15/55;C12R1/865 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 丁静静;肖明芳 |
| 地址： | 210009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种敲除酿酒酵母HO基因的方法，以酿酒酵母单倍体菌株为出发菌株，将基因敲除片段转化酿酒酵母单倍体菌株，G418抗性筛选获得阳性转化子，将含有Cre重组酶基因的质粒转化HO基因敲除的单倍体菌株，利用半乳糖诱导Cre重组酶表达，使kanMX抗性基因丢失，得到抗性基因丢失的重组菌，再通过连续培养丢失质粒，既得到敲除HO基因的酿酒酵母菌株。本发明可快速、高效地分离获得不含外来抗性基因的工业酿酒酵母单倍体，具有工艺简单、单倍体分离率高、敲除成功率高的优点。 | ||
| 搜索关键词： | 敲除 单倍体菌株 抗性基因 酿酒酵母 单倍体 工业酿酒酵母 酿酒酵母菌株 酿酒酵母菌 阳性转化子 出发菌株 基因敲除 连续培养 质粒转化 半乳糖 重组菌 质粒 成功率 诱导 转化 | ||
【主权项】：
1.一种敲除酿酒酵母菌HO基因的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)筛选酿酒酵母单倍体菌株；(2)将基因敲除片段转化酿酒酵母单倍体菌株，获得阳性转化子，所述基因敲除片段的核苷酸序列如SEQ ID NO：12所示；(3)将含有Cre重组酶基因的质粒转化步骤(2)中的阳性转化子，利用半乳糖诱导质粒中Cre重组酶表达，使抗性基因丢失，得到抗性基因丢失的重组菌，连续培养，使含有Cre重组酶基因的质粒丢失，即得到敲除HO基因的无抗性的酿酒酵母单倍体菌株。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南京工业大学，未经南京工业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201811434012.X/，转载请声明来源钻瓜专利网。
