[发明专利]一种通用型转录组编辑载体及其构建方法在审
申请号: | 201811445445.5 | 申请日: | 2018-11-29 |
公开(公告)号: | CN109576304A | 公开(公告)日: | 2019-04-05 |
发明(设计)人: | 刘旭;王英美;张涌 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/90;C12N9/22;C12N15/66 |
代理公司: | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人: | 李冉 |
地址: | 712100 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种通用型转录组编辑载体及其制备方法,对Cas13d基因进行序列优化,并且对Cas13d进行点突变,使HEPN失活;在pCas13d‑gRNA的多克隆位点处定向插入靶向目的基因的guide RNA序列,在guide RNA的辅助作用下将Cas13d蛋白定点结合到特定的目的基因序列上;利用Cas13d蛋白结合在剪接受体的作用,进行转录组编辑。本发明基于CRISPR‑Cas13d,将HEPN无活性的dCas13d设计为灵活的RNA结合模块以靶向特定的RNA元件,实现基因组编辑并且不扰乱蛋白质翻译,为RNA研究提供了一个通用工具。 | ||
搜索关键词: | 转录组 目的基因 通用型 蛋白质翻译 多克隆位点 靶向特定 蛋白结合 辅助作用 剪接受体 结合模块 通用工具 序列优化 点突变 基因组 灵活的 靶向 构建 失活 制备 蛋白 基因 扰乱 研究 | ||
【主权项】:
1.一种通用型转录组编辑载体,其特征在于,通过在多克隆位点处插入目的基因对应的guide RNA,即可对其转录组进行编辑。
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