[发明专利]一种建立基于CRISPR的基因敲减肺癌细胞株的方法及细胞株在审
| 申请号： | 201811448435.7 | 申请日： | 2018-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN111254161A | 公开（公告）日： | 2020-06-09 |
| 发明（设计）人： | 朴海龙;李同明 | 申请（专利权）人： | 中国科学院大连化学物理研究所 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N15/90;C12N5/10 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 马驰 |
| 地址： | 116023 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种肺癌细胞株的基因编辑方法。本发明基于CRISPR/Cas 9技术进行改良，通过构建表达效率更佳的重组质粒，建立一种稳定敲减肺癌基因细胞株的方法。所需shRNA通过引物合成的方式可以保证精准获得，退火后作为插入片段装入改造过的CRISPR载体中，构建成用于敲减的shRNA重组质粒。经包装慢病毒后与肺癌细胞共孵育，通过慢病毒介导将shRNA导入肺癌细胞中，对基因编辑后的肺癌细胞进行嘌呤霉素(Puromycin)抗性筛选同时进行单克隆化培养，最终获得基因敲减阳性的稳定肺癌细胞株。本方法为研究基因在肺癌发生发展中的分子机理提供了新的实验材料，对肺癌的相关建模提供参考。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 建立 基于 crispr 基因 肺癌 细胞株 方法 | ||
【主权项】：
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