[发明专利]一种快速鉴定甘薯基因组大小的方法及其应用有效
| 申请号： | 201811453895.9 | 申请日： | 2018-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN109596502B | 公开（公告）日： | 2021-07-23 |
| 发明（设计）人： | 苏一钧;曹清河;戴习彬;赵路宽;王珧;唐君;周志林;赵冬兰;张安 | 申请（专利权）人： | 江苏徐淮地区徐州农业科学研究所(江苏徐州甘薯研究中心) |
| 主分类号： | G01N15/14 | 分类号： | G01N15/14;G01N1/28 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 刘奇 |
| 地址： | 221000 江苏省徐州市徐海*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种快速鉴定甘薯基因组大小的方法，属于植物倍性检测技术领域，包括以下步骤：1)田间取甘薯茎尖组织扦插于霍格兰培养液中培养20～28h；2)取未展开叶或新生根尖与甘薯专用裂解液混合进行组织裂解；3)过滤所述裂解后的料液，收集滤液，离心，收集离心产物为裂解后的细胞；4)将所述裂解后的细胞与染液混合染色，涡旋振荡获得待检细胞液；5)将所述待检细胞液通过流式细胞仪检测所述待检细胞的FL2‑A值；6)根据所述待检细胞的FL2‑A值，计算获得所述待检细胞基因组的1C值及其基因组大小。本发明所述方法还能够鉴定番薯属其它物种的基因组大小，为甘薯及其近缘野生种基因组鉴定提供快速高效低成本的测定方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快速 鉴定 甘薯 基因组 大小 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种快速鉴定甘薯基因组大小的方法，包括以下步骤：1)田间取健康的带未展开叶的甘薯茎尖组织扦插于霍格兰培养液中培养20～28h；2)取所述培养后的茎尖组织的未展开叶或新生根尖与甘薯专用裂解液混合进行组织裂解获得裂解后的料液；3)过滤所述裂解后的料液，收集滤液，离心，收集固相组分为裂解后的细胞；4)将所述裂解后的细胞与染液混合染色，涡旋振荡获得待检细胞液；5)将所述待检细胞液通过流式细胞仪，收集5000～12000个事件，检测所述待检细胞液的FL2‑A值；6)根据所述待检细胞液的FL2‑A值，计算获得所述待检细胞的基因组1C值；所述待检细胞的基因组1C值＝(待检细胞液的FL2‑A值/参考细胞FL2‑A值)*参考细胞基因组的1C值；所述参考细胞为三裂叶野牵牛细胞；所述三裂叶野牵牛细胞的1C＝0.4683pg；所述参考细胞FL2‑A值的测定方法与所述待检细胞液的FL2‑A值的测定方法一致；所述待检细胞基因组大小＝所述待检细胞基因组的1C值*978Mb。
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