[发明专利]一种脱除甜瓜种子中黄瓜花叶病毒的方法

摘要

本发明涉及一种脱除甜瓜种子中黄瓜花叶病毒的方法，属种子处理技术领域。具体通过以下步骤完成：（1）干热处理，（2）药剂处理，（3）滤种，（4）漂洗，（5）烘干，（6）病毒检测。该方法克服了现有技术的不足，利用本发明提供的方法不仅提高了甜瓜种子的发芽率及发芽势，而且对甜瓜种子中黄瓜花叶病毒的脱除更为彻底，种子和种苗脱除率分别达到98.07%和100%。另外利用本发明提供的实时荧光定量PCR检测方法对脱毒效果进行评价，能够精确掌握脱毒种子中病毒的含量，从而在保证种子高品质的前提下，准确控制钝化病毒的技术指标，做到最大限度地抑制病毒活性。本发明提供的甜瓜种子脱毒方法不受时间限制、环境的影响，可常年在实验室或基层单位使用，非常实用，可用于脱毒甜瓜种子的规模化生产。

主权项

1.一种脱除甜瓜种子中黄瓜花叶病毒的方法，其特征在于通过以下步骤实现：（1）干热处理：将甜瓜种子置于电热鼓风干燥箱网架上65℃条件下，热风处理48 h；（2）药剂处理：待甜瓜种子自然冷却后，加入5倍体积的10%Na₃PO₄溶液，浸泡40 min；（3）滤种：药剂处理结束后，过滤种子，滤去10% Na₃PO₄溶液；（4）漂洗：用无菌水清洗甜瓜种子3‑5次，滤干无菌水；（5）烘干：及时将步骤4中得到的种子均匀摊开，置于电热鼓风干燥箱网架上，35 ℃干燥至种子含水量低于10%；（6）病毒检测：利用实时荧光定量PCR检测方法对步骤5获得的种子进行病毒检测，并根据PCR扩增曲线Ct值和标准曲线方程即可对甜瓜种子中的黄瓜花叶病毒进行精确定量，计算脱毒率。