[发明专利]一种优化苏格木勒-4汤中黄酮含量的方法

摘要

本发明属于蒙药技术领域，该方法包括如下步骤：苏格木勒‑4汤的制备方法；配制芦丁对照品溶液；选取最大波长；绘制标准曲线；单因素实验，以黄酮含量为指标，采取单因素法考察液料比，提取时间，提取温度对黄酮含量的影响；响应面法优化工艺；正交法优化工艺验证，以时间A、温度B、料液比C为实验因素，进行正交设计实验；采用响应面和正交设计实验，优化提取条件，考察提取时间、提取温度和液料比对苏格木勒‑4汤中黄酮含量的影响，以苏格木勒‑4汤中黄酮得率为指标，最佳工艺条件为料液比是1：40，时间是120min，温度时100℃，采用水浴加热回流法增加苏格木勒‑4汤中的黄酮含量简便易行，稳定可靠，适于工业化生产。

主权项

1.一种优化苏格木勒‑4汤中黄酮含量的方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：(1)、首先将酸枣仁、白豆蔻、白苣胜和荜拨药材分别粉碎成粉末，分别称取酸枣仁、白豆蔻、白苣胜和荜拨药材粉末1.5g、1.5g、1.0g、0.5g置于同一圆底烧瓶内，加入相应倍数的水振摇混匀、浸泡，将圆底烧瓶放入水浴加热回流装置的水浴锅中加热至规定温度，并在规定时间内保持规定温度，接收样品溶液：苏格木勒‑4汤，备用。(2)、配制芦丁对照品溶液用分析天平精确称取芦丁标准品10mg，置于100ml容量瓶中，用无水乙醇溶解并且定容，备用。(3)、选取最大波长移取芦丁对照品溶液和样品溶液各4ml放入同一25ml容量瓶，加入质量分数为5％的NaNO₂溶液1ml，混匀后放置6分钟，加入质量分数为10％的Al(NO₃)₃溶液1ml，混匀后放置6分钟，加入质量分数为4％的NaOH溶液10ml，然后加入超纯水稀释至刻度，混匀后放置15分钟，置于可见光分光光度计进行200～800纳米全波长扫描；另外取相应体积的显色溶液，加入超纯水定容至刻度，作为空白溶液；记录测量图谱，以确定最大吸收波长；(4)、绘制标准曲线精密移取芦丁对照品溶液0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、12.0ml，将其分别置于25ml容量瓶中，按照NaNO2‑Al(NO₃)₃‑NaOH显色方法显色，备用；用可见光分光光度计在最大吸收波长处进行吸光度测量，对照品溶液每个浓度分别记录五组吸光度数值，取其平均值，以减小误差；以吸光度A为纵坐标，芦丁浓度C(mg/ml)为横坐标，标准曲线方程为:y＝13.187x+0.0117(R²＝0.9981，R＝0.9990)；(5)、单因素实验以黄酮含量为指标，采取单因素法考察液料比，提取时间，提取温度对黄酮含量的影响。①、液料比对黄酮含量的影响按照步骤(1)所述方法加热提取，固定提取时间、温度，考察不同液料比，对黄酮含量的影响，每个实验重复3次，测定吸光度，计算黄酮含量；②、提取温度对黄酮含量的影响按照步骤(1)所述方法加热提取，固定液料比、时间，考察不同提取温度，对黄酮含量的影响，每个实验重复3次，测定吸光度，计算黄酮含量；③、提取时间对黄酮含量的影响按照步骤(1)所述方法加热提取，固定液料比、温度，考察不同提取时间，对黄酮含量的影响，每个实验重复3次，测定吸光度，计算黄酮含量；(6)、响应面法优化工艺根据Box－Benhnken的中心组合实验设计原理，综合单因素实验影响结果，在单因素实验的基础上采用三因素三水平响应面分析方法，分析因素与水平设计与响应面分析方案及实验结果；(7)、正交法优化工艺验证以时间A、温度B、料液比C为实验因素，以黄酮含量为考察指标，进行L₉(3⁴)正交设计实验。