[发明专利]一种免前处理自动化提取大体积全血DNA的方法在审
| 申请号： | 201811529488.1 | 申请日： | 2018-12-14 |
| 公开（公告）号： | CN109355287A | 公开（公告）日： | 2019-02-19 |
| 发明（设计）人： | 董涛;梁经纶;王凌云 | 申请（专利权）人： | 长春市志昂生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 长春众益专利商标事务所(普通合伙) 22211 | 代理人： | 余岩 |
| 地址： | 130000 吉林省长春市朝阳区高新北*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 一种免前处理自动化提取大体积全血DNA的方法，其特征在于包括下列步骤：1、制备一种能够吸附白细胞的磁性微球A；使用活化剂将羧基磁性纳米微球活化，再用含1～10%质量体积百分比浓度的聚乙烯亚胺的10～50mmol/L pH8.0～9.0的磷酸钠或磷酸钾缓冲液（简称PB）交联，然后用封闭液封闭，最后，将微球悬浮于10～50mmol/L pH8.0～9.0的PB，即得磁性微球A；2、从大体积全血中提取DNA；2.1）使用红细胞裂解液裂解红细胞，其过程中同时用磁性微球A吸附白细胞；2.2）使用白细胞裂解液裂解吸附在磁性微球A上的白细胞，并将释放的DNA用磁性微球B提取出来。发明的主要优点在于：整个过程克服了现有大体积全血技术必须先用手工操作进行前处理再进行自动化提取的弊端。 | ||
| 搜索关键词： | 磁性微球 全血 白细胞 前处理 吸附 自动化 裂解 红细胞 白细胞裂解液 磁性纳米微球 红细胞裂解液 磷酸钾缓冲液 聚乙烯亚胺 体积百分比 提取DNA 封闭液 活化剂 磷酸钠 活化 交联 微球 羧基 制备 悬浮 释放 封闭 | ||
【主权项】：
1.一种免前处理自动化提取大体积全血DNA的方法，其特征在于包括下列步骤：1）制备一种能够吸附白细胞的磁性微球A使用活化剂将羧基磁性纳米微球活化，再用含1～10%质量体积百分比浓度的聚乙烯亚胺的10～50mmol/L pH8.0～9.0的磷酸钠或磷酸钾缓冲液交联，然后用封闭液封闭，最后，将微球悬浮于10～50mmol/L pH8.0～9.0的缓冲液中，即得磁性微球A；2） 从大体积全血中提取DNA2.1）使用红细胞裂解液裂解红细胞，其过程中同时用磁性微球A吸附白细胞；2.2）使用白细胞裂解液裂解吸附在磁性微球A上的白细胞，并将释放的DNA用磁性微球B提取出来。
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