[发明专利]一种生物转化生产鲨肌醇的大肠埃希氏菌工程菌株及其构建方法和应用有效
申请号: | 201811529935.3 | 申请日: | 2018-12-14 |
公开(公告)号: | CN109666687B | 公开(公告)日: | 2020-08-04 |
发明(设计)人: | 韩文佳;律恩法;赵康;尹相活;朴哲;王玲 | 申请(专利权)人: | 艾美科健(中国)生物医药有限公司 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N1/21;C12P7/18;C12R1/19 |
代理公司: | 济宁汇景知识产权代理事务所(普通合伙) 37254 | 代理人: | 张艳赞 |
地址: | 272100 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一株大肠埃希氏菌工程菌株及其构建方法,以及利用该菌株进行的鲨肌醇的制造方法,属于生物技术领域,其特征在于包括稳定的重组表达质粒及重组表达质粒构建大肠埃希氏菌工程菌株pSI3的方法和利用得到的所述的重组大肠埃希氏菌工程菌株pSI3催化肌醇生产鲨肌醇的方法,本发明的有益效果是:利用该工程菌株的静息细胞法催化肌醇生产鲨肌醇,由于肌醇转运蛋白的存在,底物肌醇的浓度在反应温度下可得到最大化,可以充分利用细胞进行鲨肌醇的转化生产,利用该工程菌株进行发酵培养,处理后菌体可以收集进行静息细胞反应,发酵液粗处理后既可以用于鲨肌醇的分离提取,也可以重复用于菌株的发酵培养。 | ||
搜索关键词: | 一种 生物转化 生产 鲨肌醇 大肠 埃希氏菌 工程 菌株 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.一种稳定的重组表达质粒,其特征在于所述质粒的载体为pCOLADuet‑1,所述重组表达质粒包含:一段编码重组型蛋白表达产物基因的聚核苷酸;所述编码重组型蛋白表达产物基因的聚核苷酸包括在宿主细胞中表达肌醇‑2‑脱氢酶基因的聚核苷酸和在宿主细胞中表达鲨肌醇脱氢酶基因的聚核苷酸;所述宿主细胞为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)BL21(DE3)。
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