[发明专利]一种应用CRISPR/Cas9介导ES打靶技术制备基因打靶动物模型的方法在审
申请号: | 201811535721.7 | 申请日: | 2018-12-14 |
公开(公告)号: | CN111321171A | 公开(公告)日: | 2020-06-23 |
发明(设计)人: | 琚存祥;赵静;张明坤;吴丹;侯欢欢;高翔 | 申请(专利权)人: | 江苏集萃药康生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/90 | 分类号: | C12N15/90;C12N9/22;A01K67/027 |
代理公司: | 南京艾普利德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32297 | 代理人: | 张铂 |
地址: | 210032 江苏省南京市浦口区*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种应用CRISPR/Cas9系统基因打靶的方法,通过选择具有DNA单链切割能力的Cas9的突变体,针对每个打靶位点使用一条tracrRNA/crRNA二元复合体或者一条sgRNA,Cas9的突变体识别打靶位点附近的保守的间隔相邻基序,产生DNA单链切口,而不产生DNA双链断裂,诱导单链切口同源重组修复。本发明还提供了利用所述方法介导ES打靶技术制备基因打靶动物模型的方法。本发明降低了基因打靶过程中HMEJ修复带来的插入缺失突变,获得高效打靶阳性克隆。本发明可作为平台技术广泛用于基因打靶动物模型的制备。 | ||
搜索关键词: | 一种 应用 crispr cas9 介导 es 打靶 技术 制备 基因 动物 模型 方法 | ||
【主权项】:
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