[发明专利]感染细菌性败血症小鼠疾病模型的构建及病情判断方法

摘要

本发明公开了一种感染细菌性败血症小鼠疾病模型的构建及病情判断的方法，尤其采用大肠杆菌建立小鼠菌血症疾病模型，通过建立观察的症状与体内血液降钙素原之间的关系，首次创新的将小鼠菌血症疾病发展程度科学的分为6级，以便于判断菌血症动物疾病模型的疾病发展程度，为疾病的发展、治疗药物的筛选及疗效的科学评价打下较好的构建模型基础。采用该方法可以较好科学、快速、准确的判断出小鼠发病的严重程度及治疗情况，较好的补充了仅仅以死亡率作为模型构建指标及判断筛选药物疗效不够敏感和准确的弊端，该模型的建立方法为为治疗菌血症的药物筛选模型成功构建提供了一种便捷、快速、准确的判断方法。

主权项

1.一种感染细菌性败血症小鼠疾病模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：临床收集患有大肠杆菌疾病畜禽的病料，划线接种于麦康凯筛选培养基，37℃过夜培养；S2：挑取单个的菌落，继续分离培养；S3：对S2培养的菌落革兰氏染色与镜检，初步确定为大肠杆菌；S4：肠杆菌科的细菌生化鉴定管进行鉴定，确定分离细菌为大肠杆菌；S5：用fosA3、CTX‑M、TEM、SHV等耐药基因的引物进行扩增，确定分离的耐药大肠杆菌的耐药基因型，再用小鼠回归实验确定其致病性；S6：原菌液划麦康凯琼脂平板，挑选单个菌落，接种到液体培养基中过夜培养；S7：测定每毫升的细菌数，并将其菌液稀释；S8：选取18‑22g小鼠10只，分为空白对照组和疾病模型构建组；S9：疾病模型组按0.1ml/10g进行腹腔注射，注射菌液浓度为2.0x107CFU/mL，在各个阶段观察临床指标，观察小鼠疾病发展程度。