[发明专利]一种菜豆体细胞诱导成苗的方法及应用在审

专利信息
申请号: 201811539071.3 申请日: 2018-12-17
公开(公告)号: CN109526740A 公开(公告)日: 2019-03-29
发明(设计)人: 古瑜;刘艳军;韩启厚;于海龙 申请(专利权)人: 天津科润农业科技股份有限公司
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00
代理公司: 天津市杰盈专利代理有限公司 12207 代理人: 朱红星
地址: 300192 *** 国省代码: 天津;12
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摘要: 发明公开了一种菜豆体细胞诱导成苗的方法。包括种子消毒、种子活化、整个胚轴剥离、渗透压处理胚轴,胚轴接种于诱导培养基1号5‑30天后,切掉胚轴生长点,转接于诱导培养基1号5‑30天后,再转接于诱导培养基2号,经过1‑10天后,转接于诱导培养基1号5‑30天,随后转接入诱导培养基3号中培养10‑30天,诱导正常菜豆幼苗的过程。该方法为标准的菜豆胚状体诱导及成苗体系。可以用于解决菜豆体细胞诱导快速成苗的问题,构建了菜豆体细胞快速成苗的试验体系,为菜豆种质资源创新提供可靠的试验平台。
搜索关键词: 诱导培养基 菜豆 体细胞 胚轴 诱导 转接 成苗 快速成苗 种菜 胚状体诱导 菜豆幼苗 试验平台 试验体系 种质资源 种子活化 种子消毒 渗透压 生长点 构建 切掉 接种 剥离 应用
【主权项】:
1.一种菜豆体细胞诱导成苗的方法,其特征在于按如下的步骤进行:(1)种子消毒与活化:菜豆种子首先使用20‑40%(w/w)次氯酸钠浸没,漂洗20‑30分钟后;然后无菌水冲洗3次,每次2‑10分钟,最后直接浸泡于无菌水中15‑30小时;(2)胚轴剥离:无菌环境下切取菜豆的整个完整胚轴;(3)渗透压处理:将胚轴放入渗透压液中处理15‑30小时;所述的渗透压液指:10%‑20%的蔗糖+1‑15mg/mL6‑BA+20‑50 mg/mL腺嘌呤;(4)胚状体诱导:渗透压处理的胚轴放入诱导培养基1号中培养5‑30天;切掉胚轴的生长点,放回诱导培养基1号中培养5‑30天后,再转接入诱导培养基2号中培养1‑10天,诱导胚状体;所述的诱导培养基1号指:MS培养基+1‑15mg/mL6‑BA+20‑50 mg/mL腺嘌呤+1‑10 mg/mL尿囊素;所述的诱导培养基2号指:MS培养基+1‑15mg/mL6‑BA+20‑50 mg/mL腺嘌呤+1‑10 mg/mL尿囊素+1‑10% PEG8000;(5)诱导成苗:转接入诱导培养基1号中培养5‑30天,转接于诱导培养基3号10‑30天,直至诱导正常菜豆幼苗(无根)。
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