[发明专利]一种精准调控谷氨酸棒杆菌基因表达的方法

摘要

本发明公开了一种精准调控谷氨酸棒杆菌基因表达的方法，属于合成生物技术领域。本发明标准化的最简启动子与RBS文库，使针对目标基因表达量的调控的改造工作大幅缩短，省去了内源启动子或RBS的筛选和强度表征环节，平均一个目标基因的改造周期可以由之前的30‑40天缩短为10天以内。所述调控方法的强度跨度较单一元件高一百倍以上，由此可实现对代谢途径的大幅度调控及生物系统的功能优化。较以往的粗线条的上调或下调基因表达量的方法，本发明中的利用标准元件组合调控的方法可以更加精准、定量的调控目的基因。使代谢途径得到进行更加精准的调控，尤其是分支点处的流量调节，可提高目标产物产量，同时防止某些基因过度表达给细胞带来的代谢负担。

主权项

1.一种精准调控谷氨酸棒杆菌基因表达的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将启动子、RBS和目的基因插入到表达载体中，构建启动子与RBS联用重组表达载体；(2)将步骤(1)的重组表达载体导入谷氨酸棒杆菌宿主中，调控目的基因的表达；所述的启动子为对‑10延伸区保守序列和/或‑35区保守序列中的碱基进行突变，得到的系列强度的启动子；所述的RBS为对RBS保守序列AAAGG到翻译起始密码子ATG之间序列进行碱基突变，得到的系列强度的RBS。