[发明专利]一种用于检测细胞早期凋亡的Annexin V荧光标记的方法在审

专利信息
申请号: 201811550905.0 申请日: 2018-12-18
公开(公告)号: CN111334518A 公开(公告)日: 2020-06-26
发明(设计)人: 徐兆超;苗露;乔庆龙 申请(专利权)人: 中国科学院大连化学物理研究所
主分类号: C12N15/62 分类号: C12N15/62;C12N15/70;C07K19/00;C12Q1/02
代理公司: 沈阳晨创科技专利代理有限责任公司 21001 代理人: 张晨
地址: 116023 *** 国省代码: 辽宁;21
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摘要: 发明提供了一种用于检测细胞早期凋亡的Annexin V荧光标记的方法,具体的标记方法如下:(1)构建pET‑22b‑SNAP‑Annexin V基因融合质粒载体;(2)通过原核表达并纯化pET‑22b‑SNAP‑Annexin V融合蛋白;(3)用荧光小分子标记融合蛋白并纯化。Annexin V蛋白是目前发现的最佳PS结合受体之一,表现为对PS结合的高选择性和高结合力,荧光标记的Annexin V是目前检测早期细胞凋亡的最常用试剂之一。本发明创造了Annexin V荧光标记的新方法,首先通过基因工程方法将SNAP标签蛋白与Annexin V蛋白融合、表达并纯化,随后用连接SNAP蛋白专一底物BG基团的小分子荧光探针标记融合蛋白进而标记Annexin V,通过细胞成像或者流式细胞仪检测凋亡细胞。本发明对细胞凋亡过程研究具有重要的意义。
搜索关键词: 一种 用于 检测 细胞 早期 annexin 荧光 标记 方法
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