[发明专利]一种猪伪狂犬病毒高效价阳性血清制备方法在审
申请号: | 201811568646.4 | 申请日: | 2018-12-18 |
公开(公告)号: | CN109627330A | 公开(公告)日: | 2019-04-16 |
发明(设计)人: | 邢刚;方芳;岳丰雄;黄杰;王洁清;杨勇;徐祥兰;廖鏖 | 申请(专利权)人: | 马鞍山史记动物健康管理有限公司;成都天邦生物制品有限公司 |
主分类号: | C07K16/08 | 分类号: | C07K16/08;C07K16/06 |
代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人: | 李高峡;张娟 |
地址: | 238200 安徽省*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明提供了一种猪伪狂犬病毒高效价阳性血清的制备方法。该方法使用兔作为免疫对象,使用含有合适用量的PolyI∶C、胞壁酰二肽、西咪替丁的灭活疫苗对其免疫,生产高免血清,可在T25方瓶等体积比中和1头份疫苗试验中达到继代至少2代未出现细胞病变,满足《中国兽药典》(2015年版)中关于外源病毒检测标准为细胞法的规定。本发明具有良好的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 伪狂犬病毒 阳性血清 高效价 制备 种猪 胞壁酰二肽 中国兽药典 病毒检测 方法使用 合适用量 免疫对象 灭活疫苗 西咪替丁 细胞病变 疫苗试验 体积比 细胞法 血清 方瓶 继代 外源 中和 应用 生产 | ||
【主权项】:
1.一种猪伪狂犬病毒高效价阳性血清的制备方法,其特征在于:包含以下步骤:(1)水相制备:猪伪狂犬病病毒抗原原液经二乙烯亚胺处理,即得;(2)免疫增强剂制备:使用氯化钠溶液配制含0.1~1mg/L PolyI∶C、0.05~1mg/L胞壁酰二肽、0.5~1mg/L西咪替丁的溶液,为混合液A;在1份混合液A中加入1~10份吐温‑80、0.5~10份匹多莫德、1~10份司盘‑80、1~10份白油,前述的“份”均以体积计算;(3)灭活疫苗制备:将前述水相和免疫增强剂按1:(40~160)体积比混合成为混合液B,将混合液B与弗氏完全佐剂按1:(0.5~2)的体积比混合,乳化得灭活疫苗;(4)免疫:使用上述疫苗对兔子进行免疫,琼脂免疫扩散试验中测定血清中和滴度大于等于1:16时采血、制备血清。
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