[发明专利]一种酸枣仁黄酮类成分UPLC指纹图谱的建立方法及应用

摘要

本发明公开了一种酸枣仁黄酮类成分UPLC指纹图谱的建立方法及应用。本发明建立了能快速鉴定酸枣仁真伪的酸枣仁黄酮类成分UPLC指纹图谱，分析未知样品时，只需提取药材黄酮类成分，测定其UPLC指纹图谱，计算未知样品与共有模式的相似度，即可对未知样品进行鉴定、分类和评价。该方法快速、稳定且专属性强，基线平稳，为酸枣仁药材质量控制提供科学的新方法。

主权项

1.一种酸枣仁黄酮类成分UPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：(a)混合对照品溶液的制备：精密称取斯皮诺素、木兰花碱对照品适量，用甲醇配制成每1ml含斯皮诺素20μg、木兰花碱15μg的混合对照品溶液；(b) 供试品溶液的制备：酸枣仁粉末过筛，取1.0g，精密称定，置锥形瓶中，加50‑70%甲醇20‑30ml，称定质量，加热回流提取40‑60分钟，放冷，再称定质量，用50‑70%甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，即得；(c) 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A、0.05%甲酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱：0~7min，3%~15% A；7~10min，15%~17% A；10~15min，17% A~17% A；15~20min，17%~25% A；20~25min，25%~90% A；柱温：35℃；检测器：PDA；检测波长：254nm；流速：0.4ml/min；进样体积：1µl；（d）黄酮类成分UPLC指纹图谱的建立：分别精密吸取混合对照品溶液与供试品溶液各1µl，注入高效液相色谱仪，测定，记录色谱图；再将色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度评价软件》，建立酸枣仁黄酮类成分UPLC指纹图谱的共有模式图并计算相似度，确定具有26个共有峰；（e）色谱峰的指认：通过UPLC‑Q‑TOF‑MS方法对26个共有峰进行成分分析与指认，鉴定出6个黄酮类成分共有峰。