[发明专利]一种高效液相荧光色谱法检测水中微囊藻毒素-LR的方法

摘要

本发明公开了一种高效液相荧光色谱法检测水中微囊藻毒素‑LR的方法，具体涉及一种高效液相荧光色谱法检测水中微囊藻毒素‑LR的方法，属于水环境监测技术或农业监测技术领域。本发明基于微囊藻毒素‑LR能够在紫外光照射下激发出荧光的特点，通过对样品进行过滤、富集、洗脱、浓缩定容，采用高效液相荧光色谱方法实现水体中微囊藻毒素‑LR的快速、准确、高效的检测，对水体污染情况的监测、治理和保护都具有指导意义。

主权项

1.一种高效液相荧光色谱法检测水中微囊藻毒素‑LR的方法，其特征在于，是利用微囊藻毒素‑LR分子受激发光照射能够发射出特定荧光、热稳定性好等理化特征，在寻找和确定出最优激发光波长和发射光波长的前提下，结合固相萃取法对水样进行过滤、富集、洗脱和浓缩等前处理，并优化高效液相色谱检测条件对水体中微囊藻毒素‑LR进行快速、高灵敏的检测；具体步骤如下：步骤一、水样的预处理取水样1000mL，并将水样过0.45μm的水系滤膜，待固相萃取；步骤二、活化分离柱用甲醇5～15mL、流速2.0～5.0mL/min预洗分离柱，再用5～15mL水、流速2.0～5.0mL/min活化分离柱，并确保不让分离柱流干；步骤三、样品富集将预处理的1000mL水样以5～15mL/min的流速过已活化好的分离柱进行样品富集；步骤四、干燥分离柱先用2～10mL水以5～15mL/min流速淋洗分离柱后，再用5～15mL 20％甲醇以2～10mL/min流速再次淋洗分离柱，最后用10～30mL高纯氮气以10～30mL/min流速气推分离分离柱，并氮吹分离柱10～50min，使分离柱干燥；步骤五、样品洗脱与浓缩注射泵采用0.1％三氟乙酸甲醇溶液1～5mL、流速10～30mL/min进行清洗，再用0.1％三氟乙酸甲醇5～15mL、流速1～5mL/min洗脱分离柱，再将洗脱液过无水硫酸钠柱进行脱水干燥，最后用氮气5～15mL、流速10～30mL/min气推分离柱，并收集洗脱液；将收集的洗脱液在温度为35℃～45℃条件下浓缩，氮吹浓缩至1.0mL，并过0.45μm的有机滤膜，待高效液相色谱仪测定；步骤六、测定色谱测定条件为：采用SHIM PACK CLC‑ODS色谱柱，荧光检测器的激发波长范围为249～254nm，发射波长范围为293～298nm；流动相为甲醇(0.05％三氟乙酸)：水(0.05％三氟乙酸)＝(55～65)：(35～45)(V/V)，流速0.8～1.2mL/min，柱温30～50℃，进样量10μL。