[发明专利]一种双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法及应用

摘要

本发明属于生物传感检测技术领域，涉及一种双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法及应用。具体为一种基于聚(乙烯亚胺)功能化氮掺杂碳纳米点(NCDs@PEI)作为三联吡啶钌纳米片(RuNSs)共反应物的新型电化学发光(ECL)适配体传感器用于双酚A(BPA)的特异性检测。本发明中，由于PEI和NCDs对RuNSs的双重增强作用，NCDs@PEI可以作为RuNSs有效的共反应物，大大提高体系的发光效率，进而增强发光信号。为了提高RuNSs‑NCDs@PEI体系对BPA检测的选择性，我们创新性地引入了BPA适配体以构建新型ECL适配体传感器。构筑的ECL适配体传感器对BPA的线性响应范围为1.0×10^‑10‑1.0×10^‑4mol L^‑1，检出限为3.3×10^‑11mol L^‑1。本发明的电化学发光适配体传感器选择性好、灵敏度高，为测定实际样品中的BPA提供了一种新型适配体传感平台。

主权项

1.一种双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：(1)NCDs@PEI‑rGO复合材料的制备：首先，将柠檬酸、尿素和聚乙烯亚胺PEI加入到二次水中，置于微波炉中反应，反应结束后，冷却至室温后，得到的产物再次溶于二次水，离心，得到的上层溶液，经透析，真空干燥，得到的NCDs@PEI；将NCDs@PEI溶液加入到等体积的rGO溶液中，混合超声，制备均一的NCDs@PEI‑rGO溶液，放置室温备用；(2)将玻碳电极依次用不同粒径的三氧化二铝粉末打磨，在乙醇和水中超声后于空气中干燥；(3)将发光体Ru(bpy)₃²⁺的有机相溶液修饰到步骤(2)制备的玻碳电极表面，并在空气中干燥，待到钌相的有机溶剂挥发后形成RuNSs；(4)然后将NCDs@PEI‑rGO的溶液修饰到步骤(3)制备的电极表面，室温下晾干；(5)在步骤(4)制备的电极上滴加全氟磺酸溶液，室温下晾干后形成膜；(6)将步骤(5)修饰好的电极浸泡在HAuCl₄中，从‑0.3V到‑0.1V电位下进行电镀，时间控制在15s到30s内，在电极表面修饰上一层Au粒子AuPs，用于连接BPA适配体；(7)在一定温度下，将巯基功能化的BPA适配体反应在步骤(6)修饰好的电极上，通过Au‑S共价键固定在电极表面；形成自组装电极；(8)在一定温度下，将步骤(7)制备的自组装电极浸入牛血清白蛋白BSA溶液中孵育，以阻断剩余的非特异性结合位点，制得基于RuNSs‑NCDs@PEI的电化学发光适配体传感器。