[发明专利]人Vγ9Vδ2T细胞扩增方法与培养基

摘要

本发明公开了一种人Vγ9Vδ2T细胞扩增方法与培养基。本发明通过在人Vγ9Vδ2T细胞的扩增培养过程中添加白介素‑15和维生素C，与传统的扩增方法相比，能够提高人Vγ9Vδ2T细胞的增殖效率与细胞纯度，培养得到的人Vγ9Vδ2T细胞同时抗凋亡能力较强，细胞的存活时间较长的抗凋亡能力更强，细胞存活时间更长，并且关键杀伤分子NKG2D的表达水平更高，从而对肿瘤细胞的杀伤能力更强。

主权项

1.一种人Vγ9Vδ2T细胞扩增方法，其特征在于，包括：步骤1、从人体外周血中提取外周血单个核细胞；步骤2、提供人Vγ9Vδ2T细胞刺激扩增培养基，采用所述人Vγ9Vδ2T细胞刺激扩增培养基对所述外周血单个核细胞进行重悬，得到细胞悬液；所述人Vγ9Vδ2T细胞刺激扩增培养基包括人Vγ9Vδ2T细胞培养基以及添加于所述人Vγ9Vδ2T细胞培养基中的膦酸类化合物；所述人Vγ9Vδ2T细胞培养基包括基础培养基以及添加于所述基础培养基中的白介素‑2、白介素‑15以及维生素C；所述步骤1与步骤2的顺序可调；步骤3、将所述细胞悬液接种到细胞培养容器中培养60‑100小时；步骤4、采用所述人Vγ9Vδ2T细胞培养基进行换液，后续培养过程均采用所述人Vγ9Vδ2T细胞培养基进行。