[发明专利]一种定量检测茶树籽三萜皂苷的UPLC-UV-QTOF-MS/MS方法

摘要

本发明属于天然产物检测技术领域，具体涉及一种对茶树籽(Camellia sinensis(L.)O.Kuntze)中三萜类皂苷的UPLC‑PDA‑MS/MS的定量检测方法。一种定量检测茶树籽三萜皂苷的UPLC‑UV‑QTOF‑MS/MS方法，包括如下步骤：(1)取待测样品预处理；(2)取茶树籽中已知的任意1个或多个皂素化合物，制备标准品溶液；(3)将供试品溶液和标准品溶液高效液相色谱/紫外/质谱联用设备(UPLC‑PDA‑QTOF‑MS/MS)，采用串联质谱进行结构鉴定，采用外标法在PDA检测器下进行定量检测。本发明定量结果更加准确；灵敏度高；样品需要量少。

主权项

1.一种定量检测茶树籽三萜皂苷的UPLC‑UV‑QTOF‑MS/MS方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取待测样品干燥磨碎，过筛，以甲醇或乙醇水溶液提取，可直接用于检测；或将粗提取液浓缩后经过正己烷或石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，将正丁醇相进一步用大孔树脂或沉淀法纯化总皂素部分，再进行检测；(2)取茶树籽中已知的任意1个或多个皂素化合物，制备标准品溶液；(3)将供试品溶液和标准品溶液高效液相色谱/紫外/质谱联用设备(UPLC‑PDA‑QTOF‑MS/MS)，采用串联质谱进行结构鉴定，采用外标法在PDA检测器下进行定量检测：色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(1.8μm,150mm×2.1mm i.d.,Waters)；色谱条件为：流动相A(0.1％甲酸/水)，B相(0.1％甲酸/乙腈)；梯度洗脱，0‑4min,梯度洗脱，(32‑35％)–(35‑38％)B；4‑32min,等度洗脱(35‑38％)B；32‑58min,梯度洗脱，(35‑38％)–(43‑48％)B；58‑60min,等度洗脱，(32‑35％)B。柱温，25℃；流速，0.2‑0.3mL/min；进样量，5μL；检测波长：205‑215nm。质谱条件为：采用负离子扫描模式；扫描范围：m/z 100‑2000；雾化气(GS1)：50psi；雾化气(GS2)：50psi；气帘气(CUR)：35psi；离子源温度(TEM)：500℃；离子源电压(IS)：‑4500V；一级扫描：去簇电压(DP)：100V；聚焦电压(CE)：10V；二级扫描：使用TOF MS～Product Ion～IDA模式采集质谱数据，CID能量为40、60和80V，进样前，用CDS做质量轴校正。