[发明专利]一株内切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶双高分泌的里氏木霉工程菌及其构建方法与应用在审
| 申请号： | 201811592006.7 | 申请日： | 2018-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN109852554A | 公开（公告）日： | 2019-06-07 |
| 发明（设计）人： | 钟耀华;钟立霞;钱远超 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | C12N1/15 | 分类号： | C12N1/15;C12N15/80;C12N15/56;C12P19/14;C12P19/02 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 李健康 |
| 地址： | 250100 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一株内切葡聚糖酶和β‑葡萄糖苷酶双高分泌的里氏木霉基因工程菌，命名为里氏木霉(Trichoderma reesei)QMEB5，该菌株基因型为QM9414ΔEegl2ΔEbgl1，是以里氏木霉QM9414为出发菌，转化含内切葡聚糖酶2的基因表达盒的融合基因表达载体pTeg2，再转化含有β‑葡萄糖苷酶基因表达盒的质粒pTHB后筛选、验证获得。本发明还公开了所述工程菌株在发酵生产纤维素酶中的应用，实验证实该工程菌株的egl2的表达量较出发菌株提高了27倍，而bgl1的表达量则提高了410倍，内切葡聚糖酶和β‑葡萄糖甘酶活力分别为117.5IU/mL和34.5IU/mL。其发酵生产纤维素酶系可以高效应用于玉米芯以及其他木质纤维素酶材料的降解，具有良好的工业开发和应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 内切葡聚糖酶 里氏木霉 葡萄糖苷酶 基因表达盒 工程菌株 表达量 分泌 发酵 应用 木质纤维素酶 基因工程菌 菌株基因型 葡萄糖甘酶 纤维素酶系 表达载体 出发菌株 高效应用 工业开发 融合基因 纤维素酶 出发菌 工程菌 玉米芯 构建 降解 质粒 转化 验证 筛选 生产 | ||
【主权项】：
1.一株内切葡聚糖酶和β‑葡萄糖苷酶双高分泌的里氏木霉基因工程菌，其特征在于：所述工程菌株命名为里氏木霉(Trichoderma reesei)QMEB5，该菌株基因组中含有多拷贝内切葡聚糖酶编码基因egl2和β‑葡萄糖苷酶编码基因bgl1，其基因型为QM9414ΔEegl2ΔEbgl1，是以里氏木霉QM9414为出发菌，转化含内切葡聚糖酶2的基因表达盒的融合基因表达载体pTeg2，再转化含有β‑葡萄糖苷酶基因表达盒的质粒pTHB后筛选、验证获得。
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