[发明专利]一种嗜酸乳杆菌代谢产物中乳酸和乙酸的分析方法在审
申请号: | 201811607983.X | 申请日: | 2018-12-27 |
公开(公告)号: | CN109781873A | 公开(公告)日: | 2019-05-21 |
发明(设计)人: | 关水;孙长凯;许建强;魏佳旭;刘璐 | 申请(专利权)人: | 大连理工大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 大连格智知识产权代理有限公司 21238 | 代理人: | 刘琦 |
地址: | 116024 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明提供了一种嗜酸乳杆菌代谢产物中乳酸和乙酸的分析方法,采用高效液相色谱法定量测定。色谱条件为:流动相为0.01mol/L磷酸二氢钠缓冲溶液,流速1mL/min,柱温30℃,用C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)分离,检测波长为215nm,检测时间10min,进样量10μL。在优化的色谱条件下,乳酸和乙酸的线性范围为1.0‑50.0mmol/L,乳酸和乙酸的加标回收率分别为97.5%‑103%,96.5%‑103.8%,相对标准偏差分别为1.39%和3.56%。本方法灵敏快速,为了解细菌的生长状况和优化培养条件提供参考,并能够通过检测培养基中有机酸的种类和相互比例用于细菌的分类鉴定。 | ||
搜索关键词: | 乳酸和乙酸 嗜酸乳杆菌 代谢产物 色谱条件 检测 高效液相色谱法定量测定 细菌 相对标准偏差 优化培养条件 磷酸二氢钠 缓冲溶液 生长状况 培养基 进样量 流动相 有机酸 波长 柱温 回收率 灵敏 分析 参考 分类 优化 | ||
【主权项】:
1.一种嗜酸乳杆菌代谢产物中乳酸和乙酸的分析方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、MRS粉末溶于蒸馏水中,121℃高压灭菌15‑20min,制成MRS液体培养基;S2、将复苏活化后的嗜酸乳杆菌在OD600=0.9的条件下,以3%体积比接种到100mL上述MRS液体培养基中,37℃静置培养30h;S3、将培养液以8000r/min的转速高速离心5min,获取上清液,用0.22μm孔径过滤器过滤2次,然后将上清液稀释10倍,存于样品瓶中,4℃保存备用;S5、比较0.01mol/L的NaH2PO4和KH2PO4两种溶液作为流动相时,乳酸和乙酸的分离情况;S6、比较流动相溶液浓度分别为0.01mol/L,0.02mol/L,0.03mol/L时,对乳酸和乙酸的出峰顺序和分离效果的影响;S6、色谱条件为:流动相为0.01mol/L磷酸二氢钠缓冲溶液,流速1mL/min,柱温30℃,用C18色谱柱分离,检测波长为215nm,检测时间10min,进样量10μL。
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