[发明专利]一种牡丹的基因组原位杂交方法及其应用在审
| 申请号： | 201811610043.6 | 申请日： | 2018-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN109735602A | 公开（公告）日： | 2019-05-10 |
| 发明（设计）人： | 钟原;杜明杰;成仿云 | 申请（专利权）人： | 北京林业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6841 | 分类号： | C12Q1/6841;C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君;陈征 |
| 地址： | 100083 北京市海淀*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种牡丹的基因组原位杂交方法及其应用。本发明提供一种牡丹的基因组原位杂交方法，其采用三步法对包含探针DNA和封阻DNA的杂交混合液以及待检测染色体进行变性处理，将变性后的杂交混合液和染色体杂交；所述三步法为分别将杂交混合液和染色体进行变性处理后，再将杂交混合液和染色体混合进行共变性处理。本发明通过对基因组原位杂交的条件参数进行全面的调整和优化，得到了高效的牡丹基因组原位杂交方法，其杂交成功率和特异性显著提高，杂交信号在染色体上具有更高的清晰度，能够准确区分来自于杂交双亲本的染色体，可以在实践中用于牡丹的种质鉴定及杂交育种的遗传分析。 | ||
| 搜索关键词： | 基因组原位杂交 杂交 混合液 牡丹 染色体 变性处理 三步法 杂交育种 检测染色体 染色体杂交 条件参数 遗传分析 杂交信号 种质鉴定 探针DNA 变性 封阻 成功率 应用 优化 | ||
【主权项】：
1.一种牡丹的基因组原位杂交方法，其特征在于，采用三步法对包含探针DNA和封阻DNA的杂交混合液以及待检测染色体进行变性处理，将变性后的杂交混合液和染色体杂交；所述三步法为分别将所述杂交混合液和所述待检测染色体进行变性处理后，再将变性后的杂交混合液和染色体混合，进行共变性处理；所述杂交混合液的变性为将杂交混合液于95～98℃变性10～15min；所述待检测染色体的变性为将待检测染色体玻片于甲酰胺溶液中70～75℃水浴变性3～5min；所述共变性为将经变性处理的杂交混合液与待检测染色体混合，于80～85℃变性10～15min。
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