[发明专利]一种肺泡Ⅱ型细胞的分离方法在审
| 申请号： | 201811612024.7 | 申请日： | 2018-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN109852575A | 公开（公告）日： | 2019-06-07 |
| 发明（设计）人： | 李陶;高文华;姚辉;袁洁;武鹏月;陈宏 | 申请（专利权）人： | 河北生命原点生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 石家庄国为知识产权事务所 13120 | 代理人： | 谢茵 |
| 地址： | 050000 河北省石家庄市高*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | 本发明涉及肺细胞的分离技术领域，具体公开一种肺泡Ⅱ型细胞的分离方法，包括以下步骤：a、取出鼠肺组织，用灌注液灌洗；b、用缓冲液清洗肺泡腔，注入含有Ⅱ型胶原酶和弹性蛋白酶的消化液，消化15‑20min；c、将游离出来的肺叶剪成碎片，加入DNA酶Ⅰ和胎牛血清；d、加入洗涤液，洗涤、过滤得到细胞悬液；e、纯化肺泡Ⅱ型细胞；f、细胞培养基重悬肺泡Ⅱ型细胞。本发明分离得到的肺泡Ⅱ型细胞活性和纯度高，且分离得到的肺泡Ⅱ型细胞得率高。 | ||
| 搜索关键词： | 肺泡 细胞 分离技术领域 肺叶 弹性蛋白酶 缓冲液清洗 细胞培养基 鼠肺组织 胎牛血清 细胞活性 细胞悬液 肺细胞 灌注液 胶原酶 洗涤液 消化液 得率 灌洗 重悬 洗涤 过滤 游离 取出 消化 | ||
【主权项】：
1.一种肺泡Ⅱ型细胞的分离方法，其特征在于：包括以下步骤：a、取出肺组织，用灌注液灌洗；b、用缓冲液清洗肺泡腔，注入含有Ⅱ型胶原酶和弹性蛋白酶的消化液，消化15‑20min；c、将游离出来的肺叶剪成碎片，加入DNA酶Ⅰ和胎牛血清；d、加入洗涤液，洗涤、过滤得到细胞悬液；e、纯化肺泡Ⅱ型细胞；f、细胞培养基重悬肺泡Ⅱ型细胞。
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