[发明专利]一种人脂肪干细胞原代培养及无血清多向诱导分化方法有效
| 申请号： | 201811621469.1 | 申请日： | 2018-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN109837239B | 公开（公告）日： | 2023-10-10 |
| 发明（设计）人： | 鲁红云;李昀;罗国晶;刘红;詹艳利 | 申请（专利权）人： | 中山大学附属第五医院 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775;C12N5/077 |
| 代理公司： | 重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙) 50230 | 代理人： | 包晓静 |
| 地址： | 519000 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于生物组织工程技术领域，公开了一种人脂肪干细胞原代培养及无血清多向诱导分化方法，采用胶原酶分离法获得皮下和网膜组织来源的人脂肪间充质干细胞，原代培养至80％融合，再进行传代培养，并进行脂肪间充质干细胞的鉴定。选用生长良好的第三代细胞，加入无血清诱导培养基进行成脂、成骨诱导分化，最后进行油红O染色及茜素红染色鉴定分化效果及Real‑time RCR检测成脂、成骨基因表达情况。人脂肪组织易于获得，经原代培养所得的脂肪间充质干细胞足够存活量和存活期，且可诱导分化为成熟的成脂细胞和成骨细胞，为糖尿病、肥胖、骨质疏松症等代谢性疾病细胞治疗提供理想的种子细胞，为组织工程生物化骨、生物化脂肪提供新途径，有广阔的临床应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 脂肪 干细胞 培养 血清 多向 诱导 分化 方法 | ||
【主权项】：
1.一种人脂肪干细胞原代培养及无血清多向诱导分化方法，其特征在于：所述人脂肪干细胞原代培养及无血清多向诱导分化方法，采用胶原酶分离法获得皮下、网膜组织来源的人脂肪间充质干细胞，原代培养至80％融合，再进行传代培养，并进行脂肪间充质干细胞的鉴定。选用生长良好的第三代细胞，加入无血清诱导培养基进行诱导分化，最后进行油红O染色及茜素红染色鉴定成脂、成骨分化效果及Real‑time RCR检测成脂、成骨基因表达情况。
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