[发明专利]一种香蕉枯萎菌低丰度milRNAs的体外验证方法有效

专利信息
申请号: 201811630270.5 申请日: 2018-03-02
公开(公告)号: CN109679988B 公开(公告)日: 2020-08-14
发明(设计)人: 彭军;曾凡云;张欣;漆艳香;谢艺贤;丁兆建;刘远征;孟春亮 申请(专利权)人: 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82;C12Q1/6876
代理公司: 广州三环专利商标代理有限公司 44202 代理人: 陈欢
地址: 570100 海*** 国省代码: 海南;46
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摘要: 发明公开了一种香蕉枯萎菌低丰度milRNAs的体外验证方法,包括以下步骤:S1、在香蕉枯萎菌的基因组DNA中设计引物扩增含有候选milRNA骨架的DNA序列,将所述DNA序列连接到表达载体上;S2、构建好的载体转化到农杆菌感受态细胞,进行LB培养,得菌液;S3、用步骤S2所得菌液浸润本生烟叶片,取叶片进行对应的小RNA探针杂交检测,判断候选milRNAs发夹序列是否可以加工成为成熟的milRNA。本发明方法利用本生烟作为替代植物,可以对milRNAs的靶标及其功能进行有效的分析,可以对深度测序的数据进行高通量的分析和验证,克服了目前小RNA研究中的不足,具有广泛的应用前景。
搜索关键词: 一种 香蕉 枯萎 菌低丰度 milrnas 体外 验证 方法
【主权项】:
1.一种香蕉枯萎菌低丰度milRNAs的体外验证方法,其特征在于,包括以下步骤:S1:在香蕉枯萎菌的基因组DNA中设计引物扩增含有候选milRNA骨架的DNA序列,将所述DNA序列连接到表达载体上;S2:构建好的载体转化到农杆菌感受态细胞,进行LB培养,得菌液;S3:用步骤S2所得菌液浸润本生烟叶片,取叶片进行对应的小RNA探针杂交检测,判断候选milRNAs发夹序列是否可以加工成为成熟的milRNA。
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