[发明专利]枣果中环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷的提取方法

摘要

本发明公开了一种枣果中环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷的制备方法，该制备方法按以下步骤顺序进行：制备枣粗提物、醇沉、大孔树脂层析柱分离、膜分离、制备液相色谱分离。该方法以醇为提取液，采用大孔吸附树脂分离、膜分离、制备液相色谱分离三种分离手段，获得的环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷纯度高，环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷的纯度分别达90%以上。应用制备液相色谱还可以实现在线监测，针对性分离，分离效率高。

主权项

1.一种枣果中环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷的制备方法，其特征在于：该制备方法按以下步骤顺序进行：（1）制备枣粗提物将枣果，去核，粉碎得枣粉末，将枣粉末按枣粉末与提取溶剂重量体积比1：6~10的比例加入提取溶剂中，进行加热加压提取15~30 min或加热回流提取1~2 h，提取温度为70℃~90℃，重复提取2~3次，合并提取液，减压浓缩，回收有机溶剂，得枣粗提物；（2）醇沉将步骤（1）中枣粗提物加入60%~80%乙醇水溶液中，2℃~8℃静置24~48 h，过滤，上清液减压浓缩，得环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷粗提取物；（3）大孔树脂层析柱分离将步骤（2）的环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷粗提取物加入大孔树脂层析柱中，上样量与分离材料体积比1：100~500，分离步骤为：首先用纯水洗至层析柱无色，再用2~5个柱体积的洗脱液洗脱，流速1~3个柱体积/小时，收集洗脱液，得到环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷混合提取物；（4）膜分离将步骤（3）中的环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷混合提取物，采用纳滤膜过滤，上清液减压浓缩，回收有机溶剂，得环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷混合组分；（5）制备液相色谱分离将（4）环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷混合组分经制备液相色谱仪分离，分别收集环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷组分，分别得到环磷酸腺苷制备组分和环磷酸鸟苷制备组分。